將微生物接種在只缺少某種營養物質的基礎培養基中，再將所缺的營養物質點植于平板上，該營養物質便逐漸擴散于植點周圍。該微生物若需要此種營養物質，便在這種營養物質擴散處生長繁殖，形成肉眼可見的菌落圈，這種測定微生物營養需求的方法稱為生長譜法。某興趣小組嘗試用生長譜法測定某種大腸桿菌對糖類（碳源）的需求情況，操作流程如下：
Ⅰ.培養基的制備。該小組所用無碳培養基配方如表（加水定容至1L）：
| 成分 | NaCl | KH2PO4 | K2HPO4 | （HN4）2SO4 | MgSO4?7H2O | 瓊脂 |
| 質量/g | 1 | 0.5 | 0.5 | 2 | 0.2 | 20 |
Ⅱ.將大腸桿菌懸液與溶化并冷卻至50℃的固體培養基混勻，倒平板。
Ⅲ.將已凝固的平板背面用記號筆劃分為四個區，并注明要點植的糖類名稱。
Ⅳ.通過無菌操作分別加入蘸有不同糖類的無菌濾紙片，待平板吸收干燥后倒置培養24小時。
結合所學知識，回答下列問題：
（1）無碳培養基配方中加入（NH4）2SO4的目的是
提供氮源（供微生物合成含氮有機物）
提供氮源（供微生物合成含氮有機物）
。對培養基及糖溶液通常采用的滅菌方法是 高壓蒸汽滅菌
高壓蒸汽滅菌
。倒平板后用 稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法進行接種。（2）該小組發現最終在培養基的四個區內均有菌落圈產生，但大小不同，據此得到的初步結論是
大腸桿菌可以利用四種糖類（葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖）作為碳源，但利用的程度不同
大腸桿菌可以利用四種糖類（葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖）作為碳源，但利用的程度不同
。（3）生長譜法還可用于某些營養缺陷型菌株（失去合成某種生長因子能力的菌株）的篩選和鑒定，例如大腸桿菌經紫外線誘變處理后會產生一些營養缺陷型突變個體，現已純化并制備出某營養缺陷型的菌懸液，但不清楚是氨基酸缺陷型、維生素缺陷型還是氨基酸-維生素缺陷型，某生物興趣小組用生長譜法設計實驗進行鑒定，請將他們的實驗設計補充完整。
實驗思路：將菌懸液與溶化并冷卻至50℃的不含氨基酸和維生素的基礎培養基混勻，倒平板；將培養基劃分成兩個相等的區域A、B；A區
點植氨基酸
點植氨基酸
、B區 點植維生素
點植維生素
；在適宜溫度下培養，觀察菌落產生的區域。實驗結果及結論：
若菌落只在A區產生，則為氨基酸缺陷型 若菌落只在B區產生，則為維生素缺陷型；若菌落產生在AB交界處，則為氨基酸-維生素缺陷型
若菌落只在A區產生，則為氨基酸缺陷型 若菌落只在B區產生，則為維生素缺陷型；若菌落產生在AB交界處，則為氨基酸-維生素缺陷型
。【答案】提供氮源（供微生物合成含氮有機物）；高壓蒸汽滅菌；稀釋涂布平板；大腸桿菌可以利用四種糖類（葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖）作為碳源，但利用的程度不同；點植氨基酸；點植維生素；若菌落只在A區產生，則為氨基酸缺陷型 若菌落只在B區產生，則為維生素缺陷型；若菌落產生在AB交界處，則為氨基酸-維生素缺陷型
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：3難度：0.7
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發布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
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（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結構有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應選用表中的培養液，針對不選用的其他培養液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產生的酶活力的測定結果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養液配方培養液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
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