芽孢桿菌生長迅速，營養要求簡單，且能形成抗逆性很強的芽孢。某實驗小組欲以黃瓜灰霉病菌作為指示菌，從采集到的土樣中分離芽孢桿菌，并從分離到的芽孢桿菌中篩選高效廣譜拮抗菌（指一種菌能產生某種物質抑制另外一種菌的生存），其所需培養基和實驗步驟如下。回答下列問題：
（一）培養基
PB培養基：用于病原細菌的培養和病原細菌拮抗菌的培養、篩選及保存。
PDA培養基：用于病原真菌的培養和病原真菌拮抗菌的篩選。
（二）實驗步驟
（1）芽孢桿菌的分離和純化
準確稱取10g土壤樣品，加入到盛有90 mL的無菌水中，振蕩靜止后再用 無菌移液器無菌移液器吸取10mL土壤懸液加到90 mL無菌水中，充分混勻，即得 102102倍稀釋液，然后以此類推逐步梯度稀釋至適當濃度，取合適稀釋度下的菌液，涂布接種于 PBPB固體培養基上。根據菌落的 大小、形狀、質地、顏色、光澤、透明度大小、形狀、質地、顏色、光澤、透明度（答三個）等特征，挑取不同形態的單菌落，作為待測原始菌株。
（2）拮抗菌的初篩--五點對峙法
在PDA平板中心接種黃瓜灰霉病菌菌餅，四周等距離接種待篩選芽孢桿菌，25℃恒溫培養，每個篩選實驗重復3次，目的是 避免實驗的偶然性，使實驗結果更可靠避免實驗的偶然性，使實驗結果更可靠。根據 各篩選菌產生的抑菌圈大小各篩選菌產生的抑菌圈大小比較拮抗能力，從而保留拮抗效果優良的菌株。
（3）探究培養時間對抗菌物質的影響
實驗小組通過篩選找出了優良的芽孢桿菌菌株ch-22，現欲探究培養時間對其產生的抗菌物質活性的影響，請簡要寫出實驗思路：取適量菌株ch-22接種于一定量的富集培養液巾，適宜條件下，分別培養不同時間（24h、36h、48h、60h、72h、84h……）后，取發酵液過濾除菌，采用“五點對峙法”檢測不同時間等量培養液中抗菌物質的抑菌效果（培養時間可改變）取適量菌株ch-22接種于一定量的富集培養液巾，適宜條件下，分別培養不同時間（24h、36h、48h、60h、72h、84h……）后，取發酵液過濾除菌，采用“五點對峙法”檢測不同時間等量培養液中抗菌物質的抑菌效果（培養時間可改變）。
【答案】無菌移液器；102；PB；大小、形狀、質地、顏色、光澤、透明度；避免實驗的偶然性，使實驗結果更可靠；各篩選菌產生的抑菌圈大??；取適量菌株ch-22接種于一定量的富集培養液巾，適宜條件下，分別培養不同時間（24h、36h、48h、60h、72h、84h……）后，取發酵液過濾除菌，采用“五點對峙法”檢測不同時間等量培養液中抗菌物質的抑菌效果（培養時間可改變）
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：11難度：0.7
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1．回答下列關于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結構有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應選用表中的培養液，針對不選用的其他培養液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產生的酶活力的測定結果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養液配方培養液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數（如圖所示），以期為修復污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />
發布：2024/12/31 4:0:1組卷：17難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環保領域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，并了解其生長規律，進行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養與觀察：一般來說，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度及培養時間），馴化后的脫硫細菌表現出穩定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
（4）探究生長規律：在計數時，計數方法有稀釋涂布平板法和直接計數法．在用稀釋涂布平板法進行計數時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統計的菌落數往往比活菌的實際數目．發布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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