灰霉病菌感染使作物減產，因化學防治措施會引起諸多副作用，科研人員以黃瓜灰霉病菌為指示菌對BA-KA4解淀粉芽孢桿菌的防治效果進行了研究。
（1）BA-KA4解淀粉芽孢桿菌與酵母菌結構最主要的區(qū)別是

沒有核膜包被的細胞核

沒有核膜包被的細胞核

。可利用

稀釋涂布平板法或平板劃線

稀釋涂布平板法或平板劃線

方法對土壤樣品中的微生物進行分離和純化，篩選獲得BA-KA4解淀粉芽孢桿菌。
（2）實驗一：為了確定起主要抑菌作用的是BA-KA4菌體細胞，還是BA-KA4菌體釋放到胞外的抑菌物質，實驗步驟如下：
①挑取BA-KA4菌株單菌落接種于液體培養(yǎng)基中，28℃恒溫培養(yǎng)48 h,離心收集上清液并過孔徑0.22μm的濾膜得到無菌發(fā)酵液。收集離心獲得的菌體，超聲波破碎，用培養(yǎng)基稀釋到原體積，經離心收集上清液為菌體破碎液。
②實驗組和對照組處理如下表：請完善實驗方案中的Ⅰ和Ⅱ

組別	第一步	第二步	第三步	抑菌率
對照組A	Ⅰ. 1mL無菌水 1mL無菌水	倒入25mLPDA培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基凝固后，在中央接入直徑5mm的灰霉菌菌塊	22℃恒溫培養(yǎng)至菌絲剛長滿平板時，測量灰霉菌菌落直徑（R0）	0
實驗組B	加1mLBA-KA4的無菌發(fā)酵液至培養(yǎng)皿中	同上	同時測量灰霉菌的菌落直徑（R1）	63.87%
實驗組C	加1mLBA-KA4的菌體破碎液至培養(yǎng)皿中	Ⅱ 同上 同上	同時測量灰霉菌的菌落直徑（R2）	41.17%

注：PDA是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡稱，抑菌率=

R

0

-

R

R

0

×100%
③實驗結果說明

該菌株的無菌發(fā)酵液具有較強的抑菌活性，而細胞破碎液的抑菌活性較低，說明該菌主要通過分泌到胞外的抑菌物質起到拮抗病原菌的作用

該菌株的無菌發(fā)酵液具有較強的抑菌活性，而細胞破碎液的抑菌活性較低，說明該菌主要通過分泌到胞外的抑菌物質起到拮抗病原菌的作用

。
（3）實驗二：圖1是溫度、pH值對BA-KA4菌株的無菌發(fā)酵液抑菌穩(wěn)定性的研究結果：
實驗結果說明，BA-KA4菌株的胞外抑菌物質有良好的溫度、pH穩(wěn)定性，可作為灰霉病菌生物防治的優(yōu)良微生物資源，具有良好的開發(fā)前景。做出此判定的依據是

無論是溫度、還是酸堿處理，BA-KA4菌株的無菌發(fā)酵液相對抑菌活性最低仍可達到55.50%，說明BA-KA4菌株胞外抑菌物質具有良好的溫度、pH穩(wěn)定性

無論是溫度、還是酸堿處理，BA-KA4菌株的無菌發(fā)酵液相對抑菌活性最低仍可達到55.50%，說明BA-KA4菌株胞外抑菌物質具有良好的溫度、pH穩(wěn)定性

。
（4）請你談一談與化學防治相比，生物防治的優(yōu)勢是

降低環(huán)境污染；減少化學藥劑在果實中的殘留；對其他生物干擾小；污染小，安全性高；作用持久；減小病菌抗藥性等

降低環(huán)境污染；減少化學藥劑在果實中的殘留；對其他生物干擾小；污染小，安全性高；作用持久；減小病菌抗藥性等

（至少說兩點）。