奶酪是一種被廣泛食用的發酵奶制品。大多數奶酪的生產需要使用凝乳酶來凝聚固化奶中的蛋白質。科學家將編碼牛凝乳酶的基因導入大腸桿菌的基因組中，再通過工業發酵批量生產凝乳酶。請回答下列問題：
（1）科學家們常用PCR技術擴增牛凝乳酶基因，該反應需要在一定的緩沖溶液中進行，還需要提供DNA模板、2種引物、dATP、dTTP、dCTP、dGTP和 耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）等物質。
（2）在構建基因表達載體時，科學家們常選擇雙酶切（同時用兩種限制酶切割含目的基因的DNA和質粒），與單一酶切相比，雙酶切的優點是可以避免出現 目的基因與質粒任意連接（或目的基因與目的基因、質粒與質粒發生自身連接或自身（連接）環化等）目的基因與質粒任意連接（或目的基因與目的基因、質粒與質粒發生自身連接或自身（連接）環化等）。
（3）科學家們常用 Ca2+（或CaCl2）Ca2+（或CaCl2）處理大腸桿菌細胞，使其處于一種能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態，然后再將重組的基因表達載體導入其中。嘗試推測科學家們確定轉基因大腸桿菌是否產生牛凝乳酶的方法思路是 培養大腸桿菌，分離提純其產生的蛋白質，并進行鑒定（抗原—抗體雜交反應）確定是否含有牛凝乳酶培養大腸桿菌，分離提純其產生的蛋白質，并進行鑒定（抗原—抗體雜交反應）確定是否含有牛凝乳酶。
（4）篩選出轉化成功的大腸桿菌后，科學家們常將其轉入LB培養基中進行擴大培養，從物理性質上分該培養基屬于 液體液體培養基，LB培養基應中含有 水、碳源、氮源、無機鹽水、碳源、氮源、無機鹽等四類基本營養物質。
（5）為確定轉基因大腸桿菌的平均產酶能力，常需對轉基因大腸桿菌的活菌進行計數，推測科學家最可能用到的計數方法是 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法。該計數方法也可用于微生物的分離，其分離微生物的原理是 通過（梯度）稀釋將聚集的菌種分離（分散）成單個細胞，并在培養基上形成單個菌落通過（梯度）稀釋將聚集的菌種分離（分散）成單個細胞，并在培養基上形成單個菌落。除上述方法外，科學家們還可以用 平板劃線法平板劃線法法分離獲得高產大腸桿菌菌株。
【答案】耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）；目的基因與質粒任意連接（或目的基因與目的基因、質粒與質粒發生自身連接或自身（連接）環化等）；Ca2+（或CaCl2）；培養大腸桿菌，分離提純其產生的蛋白質，并進行鑒定（抗原—抗體雜交反應）確定是否含有牛凝乳酶；液體；水、碳源、氮源、無機鹽；稀釋涂布平板法；通過（梯度）稀釋將聚集的菌種分離（分散）成單個細胞，并在培養基上形成單個菌落；平板劃線法
【解答】
【點評】
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