聚羥基丁酸酯（PHB）是某些細菌在碳源充足，氮源缺乏狀態下產生的一類顆粒狀、可作為細菌體內碳源和能量儲備物的高分子化合物，能被蘇丹染料染色，可溶于氯仿。PHB具有生物可降解性和生物相容性，用于可降解包裝材料及醫藥行業。天然菌中的PHB產量較低，對天然菌進行誘變和篩選可得到高產PHB合成菌。
（1）PHB合成菌的分離培養基的成分為葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和瓊脂，該培養基中氮源主要來自

蛋白胨

蛋白胨

，為使PHB合成菌胞體內積聚更多PHB，該培養基成分配比的特點是

氮源較低

氮源較低

。
（2）將等濃度土壤稀釋液接種在PHB分離培養基上后，甲組用紫外線照射，乙組不作處理。培養一段時間后，發現甲組的菌落數少于乙組，原因是

紫外線會殺死細菌

紫外線會殺死細菌

。通過顯微觀察法初篩PHB合成菌的方法是

在培養基中加入蘇丹染料，然后在顯微鏡下觀察，有較多橘黃色顆粒的細菌即為PHB合成菌

在培養基中加入蘇丹染料，然后在顯微鏡下觀察，有較多橘黃色顆粒的細菌即為PHB合成菌

。復篩時需要提取胞體內的PHB，方法是

細胞破碎和用氯仿來萃取PHB，從而提取胞體內的PHB

細胞破碎和用氯仿來萃取PHB，從而提取胞體內的PHB

。
（3）對復篩得到的A～E五個菌株單獨培養，檢測PHB產量，結果如圖。A～E株菌中適于作工程菌的是

菌株D

菌株D

，其它菌株不適合作工程菌的原因是

PHB產量較低、不穩定、合成效率較差

PHB產量較低、不穩定、合成效率較差

。

（4）在發酵罐中連續發酵生產PHB時，除控制發酵溫度、pH并隨時檢測培養液中PHB合成菌的數量外，還應

檢測PHB濃度、及時添加必需的營養組分

檢測PHB濃度、及時添加必需的營養組分

（答出2條）。