乳糖不耐癥是由于乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹瀉?？蒲泄ぷ髡呃蒙锛夹g培育出轉基因低乳糖奶牛新品種，給患乳糖不耐癥患者帶來福音。如圖1為轉基因低乳糖奶牛培育流程，圖2是使用限制酶BamHⅠ切割DNA產生的結果。請分析回答問題：
（1）科學家在構建重組質粒T時，首先采用PCR技術對LCT基因進行擴增，在擴增目的基因的操作過程中，加入的物質有：模板DNA、引物、4種脫氧核苷酸以及TaqDNA聚合酶（Taq酶）TaqDNA聚合酶（Taq酶）酶；若一個該DNA分子在PCR儀中經過4次循環，需要3030個引物，產物中共有88個等長的LCT基因片段。
（2）圖1中的牛胎兒成纖維細胞無法直接發育成個體，需要利用去核卵母細胞構建重組細胞才能培育出新個體，其依據的原理是動物細胞核具有全能性動物細胞核具有全能性。
（3）據圖2分析，BamHⅠ的識別序列以及切割位點（用“↓”表示）是
。
（4）圖1中，切割質粒S用的酶是BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ，切割后形成1.8kb和8.2kb（1kb=1000對堿基）兩種片段。若用BamHⅠ和EcoRⅠ兩種酶切割重組質粒T，獲得1.6kb和8.8kb兩種片段，則轉入的LCT基因長度為2.22.2kb。
（5）在轉基因低乳糖奶牛的乳腺細胞中，可檢測到的物質有ABCABC。（填編號）
A．LCT基因
B．LCTmRNA
C．LCT
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】TaqDNA聚合酶（Taq酶）；30；8；動物細胞核具有全能性；；BamHⅠ和HindⅢ；2.2；ABC
；BamHⅠ和HindⅢ；2.2；ABC【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：20引用：2難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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