2020年諾貝爾化學獎授予了兩位開發出CRISPR/Cas9基因編輯技術的科學家，該技術在實體瘤研究中得到廣泛應用。
（1）Cas9是一種來自細菌的核酸內切酶，其由相關基因指導在核糖體核糖體上合成，它與sgRNA構成的復合體能與DNA分子特定堿基序列結合，如圖1所示，據圖1分析，作用原理是sgRNA能與DNA單鏈進行堿基互補配對堿基互補配對，Cas9能在NGGPAM序列（幾乎存在于所有基因中）上游切斷DNA雙鏈的磷酸二酯磷酸二酯鍵。
（2）結直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，研究發現APC基因發生突變引起的結腸和直腸腺瘤性息肉與結直腸癌密切相關。將Cas9Cas9基因及靶向小鼠APC基因的16號外顯子的雙鏈sgRNA拼接后形成目的基因目的基因與慢病毒載體結合，導入小鼠結腸細胞，獲得APC基因缺失的結腸細胞，通過黏膜注射，將APC基因缺失結腸細胞原位移植入免疫缺陷小鼠，生成腺瘤，獲得結直腸癌小鼠模型，請寫出該模型的一種應用研究藥物對結直腸癌小鼠的治療效果，研究結直腸癌發病機理研究藥物對結直腸癌小鼠的治療效果，研究結直腸癌發病機理。
（3）CRISPR/Cas9技術還可用于結直腸癌相關基因功能的研究。研究人員通過CRISPR/Cas9技術在人結腸癌細胞HRT18中敲除產促紅細胞生成素人干細胞A1受體基因（EPHA1基因），進行細胞劃痕實驗。
補充圖中步驟①空質粒空質粒，②胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶，③貼壁貼壁。由圖可知，與另外兩組相比，48h后c組細胞劃痕的寬度較小小，說明EPHA1基因可抑制人結腸癌細胞擴散轉移EPHA1基因可抑制人結腸癌細胞擴散轉移。
（4）請寫出CRISPR/Cas9基因編輯技術其他可能的一項應用基因治療、動植物品種改良基因治療、動植物品種改良。
【考點】動物細胞培養的條件與過程．
【答案】核糖體；堿基互補配對；磷酸二酯；Cas9；目的基因；研究藥物對結直腸癌小鼠的治療效果，研究結直腸癌發病機理；空質粒；胰蛋白酶或膠原蛋白酶；貼壁；小；EPHA1基因可抑制人結腸癌細胞擴散轉移；基因治療、動植物品種改良
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：26引用：1難度：0.7
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1．動物細胞培養和植物組織培養是細胞工程的基本技術，下列關于這兩項技術的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動物克隆和胚胎工程有關的問題：
（1）幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。在進行基因工程操作時，可以從植物體中提取幾丁質酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動物成纖維細胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養基、添加牛血清、以支持生長等措施。當第一個卡氏瓶中的細胞濃度不再增加時，若要細胞繼續增殖，可采用的方法是。細胞培養過程中，培養箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關于胚胎工程的敘述，錯誤的是
A．在動物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數排卵
B．若在囊胚期進行胚胎分割，內細胞團均等分割，滋養成則不必
C．可以從雌性動物體內卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細胞進一步培養成熟
D．胚胎成纖維細胞可以用于胚胎干細胞的培養，因為其能分泌抑制細胞分化的物質。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：4引用：1難度：0.7 -
3．據國際糖尿病聯盟最新數據，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬成人因糖尿病或其并發癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請回答下列問題：
（1）從患者體內獲得體細胞后，對其進行的初次培養稱為，培養的細胞在貼壁生長至鋪滿培養皿底時停止分裂，這種現象稱為。一般來說，動物細胞培養需要的條件有（少答出兩點）。
（2）利用PCR技術擴增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學家將胰島素β鏈的第28和29個氨基酸調換順序，成功獲得了速效胰島素。生產速效胰島素，需要對進行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測胰島類似細胞是否具有胰島B細胞的正常生理功能，可設計如下實驗：將等量的胰島類似細胞與正常胰島B細胞分別加入兩組相等濃度的培養液中，適宜且相同條件下進行培養，一段時間后分別檢測兩組培養液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優點是。發布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6
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