四尾柵藻具有環境適應能力強和生長速度快等優點，如果能將其進行品種改良，提高含油量，有望解決微藻生物柴油產業化進程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術將油料作物紫蘇DGAT1基因導入四尾柵藻，獲得轉基因的產油微藻，利用地熱廢水培養，不僅能生產生物柴油，還能治理地熱廢水。操作過程如圖，請回答下列問題：
注：LacZ基因編碼產生的酶可以分解物質X-gal,從而使菌落顯現出藍色。若無該基因或該基因被破壞，則菌落呈白色。
（1）將質粒pMD19-DGAT1導入大腸桿菌前，通常先用Ca2+處理大腸桿菌，使細胞處于一種 能吸收周圍環境中DNA分子能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態。
（2）為了便于篩選含pMD19-DGAT1重組質粒的大腸桿菌，該選擇培養基中應添加 卡那霉素和X-gal卡那霉素和X-gal物質。在培養基中挑取 白色白色顏色的大腸桿菌菌落可提取該 質粒并獲取目的基因。
（3）由如圖推測，用 EcoRⅠEcoRⅠ和 SmaⅠSmaⅠ酶切割pMD19-DGAT1獲得DGATI基因，并與酶切后的載體pBI121連接再次構建基因表達載體，用這兩種酶切割的目的是 保證其準確插入質粒（定向連接）并防止其出現自身環化等問題（或防止反向連接和自身環化）保證其準確插入質粒（定向連接）并防止其出現自身環化等問題（或防止反向連接和自身環化）。
（4）啟動子往往具有物種特異性，在載體pBI121質粒中插入紫蘇DGAT1基因，其上游啟動子應選擇 BB（填字母）。
A．紫蘇DGAT1基因啟動子 B．四尾柵藻啟動子 C．大腸桿菌啟動子
（5）為了判斷DGAT1基因是否導入四尾柵藻細胞，可利用 聚合酶鏈式反應聚合酶鏈式反應（中文全稱）等技術進行檢測。
（6）為檢測轉基因四尾柵藻對地熱廢水的去污能力，研究人員設計實驗并得到相應實驗結果如表。
| 指標 | 總氮（mg/L） | 總磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 廢水培養基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培養轉基因四尾柵藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
應添加對照組：廢水培養非轉基因四尾柵藻 11 天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
應添加對照組：廢水培養非轉基因四尾柵藻 11 天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】能吸收周圍環境中DNA分子；卡那霉素和X-gal；白色；EcoRⅠ；SmaⅠ；保證其準確插入質粒（定向連接）并防止其出現自身環化等問題（或防止反向連接和自身環化）；B；聚合酶鏈式反應；應添加對照組：廢水培養非轉基因四尾柵藻 11 天后，檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
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發布：2024/12/18 13:30:2組卷：33引用：3難度：0.5
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