回答有關(guān)生物技術(shù)的問題．
Ⅰ、抗體的制備經(jīng)歷了細胞學層面和分子學層面兩種合成途徑的研究．下列是生物學技術(shù)制備抗體的兩個途徑模式簡圖．

（1）在獲取抗體之前，需要向健康人體注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重復注射一次．免疫學稱細胞A為

漿細胞（效應B淋巴細胞）

漿細胞（效應B淋巴細胞）

，該細胞在人體主要介導

體液

體液

免疫．
（2）過程①至②抗體的獲取稱為

單克隆抗體

單克隆抗體

，其中①是

細胞融合

細胞融合

過程，Y細胞稱為

雜交瘤細胞

雜交瘤細胞

．
Ⅱ、上圖中，結(jié)構(gòu)甲的建構(gòu)可用圖1和2表示．圖1表示含有目的基因的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列．現(xiàn)有4種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為如表所示．

限制酶	MspⅠ	BamHⅠ	MboⅠ	SmaⅠ
識別序列及切割位點

（3）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，其產(chǎn)物長度為

537、790、661

537、790、661

．
（4）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞.從雜合子中分離出圖1及對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有

4

4

種不同長度的DNA片段．
（5）上述結(jié)構(gòu)中的建構(gòu)過程可知，在限制酶作用下得到的產(chǎn)物有多種，生產(chǎn)上多采用

酶的固定化

酶的固定化

技術(shù)來降低目的基因分離提取的難度，也有利于限制酶的回收和再利用．
（6）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行拼接，形成重組質(zhì)粒，那么應選用的限制酶是

BamHⅠ

BamHⅠ

．在導入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要添加

抗生素B

抗生素B

的

固體

固體

（固體/液體）培養(yǎng)基進行培養(yǎng)．在培養(yǎng)前，培養(yǎng)基必須先經(jīng)過滅菌，所用的方法是

高壓滅菌

高壓滅菌

；采用

劃線（或涂布

劃線（或涂布

的方法接種以獲得單菌落后繼續(xù)篩選．