新冠病毒（SARS-CoV-2）的重組蛋白疫苗、核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等疫苗都在研發當中。下圖為其中一種疫苗的研發思路；圖中①～⑦表示過程，B處箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點（四種酶的識別序列詳見表），標記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養基中的蔗糖生存。

限制酶	NcoⅠ	SphⅠ	NheⅠ	BamHⅠ
識別序列和切割位點	C↓CATGG	GCATG↓C	G↓GATCC	G↓CTAGC

（1）圖中①過程需要使用

逆轉錄（酶）

逆轉錄（酶）

酶先得到cDNA，再使用

PCR

PCR

技術擴增得到s蛋白基因。
（2）為使③過程順利進行，需先使用限制酶

NheⅠ和BamHⅠ

NheⅠ和BamHⅠ

切割質粒B，再選用兩種限制酶對新冠病毒的S蛋白基因進行切割的目的是

防止 S 蛋白基因自身環化、防止 S 蛋白基因與運載體反向連接、防止運載體自身環化

防止 S 蛋白基因自身環化、防止 S 蛋白基因與運載體反向連接、防止運載體自身環化

（答出1點即可）。
（3）S蛋白基因整合到受體細胞基因組上，最終能否翻譯出S蛋白至關重要，因此需要進行蛋白質的檢測，從受體細胞中提取

蛋白質

蛋白質

后，然后利用相應的

抗體

抗體

進行檢測。
（4）為檢驗疫苗的效果，常常將重組疫苗注入志愿者體內，參加臨床試驗的志愿者需要滿足的條件之一是

無

無

（ 選填“有”或“無”） SARS-CoV-2感染史。重組疫苗注入志愿者體內后，S蛋白基因指導合成的S蛋白作為抗原，刺激機體產生能與之相結合的抗體，

抗體的分泌量

抗體的分泌量

可作為檢測疫苗對志愿者免疫效果的指標。