基因測序技術在臨床和科研中發揮著越來越重要的作用,該技術通常包括核酸提取、核酸擴增、產物檢測3個步驟。
(1)已知SDS(十二烷基硫酸鈉)可以使蛋白質變性,在利用真核生物做材料進行DNA粗提取時,通常在研磨液中加入SDS的目的是 使蛋白質變性,與DNA分離使蛋白質變性,與DNA分離。DNA粗提取過程中常用到體積分數為95%的冷酒精,其作用是 分離DNA和蛋白質分離DNA和蛋白質。
(2)測序技術通常需要用PCR技術擴增待測分子。如表是某研究小組設計的兩組引物,其中不合理的是 BB,原因是 引物太短、特異性弱;兩個引物會互補結合引物太短、特異性弱;兩個引物會互補結合。
引物 | 序列 |
A | 5′-GCCCTCTACTCCCCGGTCTTG-3′ 5′-GCCCATCTGCAAGTTATCCTA-3′ |
B | 5′-GGGATT-3′ 5′-AATCCC-3 |
dNTP的3'端不能形成磷酸二酯鍵導致復制停止,形成長短不一的DNA片段
dNTP的3'端不能形成磷酸二酯鍵導致復制停止,形成長短不一的DNA片段
。據圖分析,待測DNA片段的堿基序列是3′-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-
-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-
5′。
(4)第二代測序又稱為高通量測序。二代測序在DNA復制過程中通過捕捉新添加的堿基所攜帶的特殊標記(一般為熒光分子標記)來確定DNA的序列。這就要求在測序時,DNA分子必須同步復制,來增強熒光信號強度從而讀出DNA序列。據此分析,二代測序技術不適合測量較
長
長
(填“長”或“短”)的DNA序列,原因是 DNA分子越長,基因復制的同步性降低,導致堿基測序質量下降
DNA分子越長,基因復制的同步性降低,導致堿基測序質量下降
。【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】使蛋白質變性,與DNA分離;分離DNA和蛋白質;B;引物太短、特異性弱;兩個引物會互補結合;dNTP的3'端不能形成磷酸二酯鍵導致復制停止,形成長短不一的DNA片段;-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-;長;DNA分子越長,基因復制的同步性降低,導致堿基測序質量下降
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:37引用:1難度:0.6
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