黃曲霉毒素主要是由黃曲霉和寄生曲霉等多種真菌產生的次級代謝產物，包括AFB₁、AFB₂、AFG₁等多種衍生物。黃曲霉毒素的毒性強，具有抑制免疫、誘導突變和致癌的作用，香豆素是黃曲霉毒素的結構類似物。黃曲霉毒素的生物去除法是利用微生物分泌的酶降解黃曲霉毒素，產生低毒或無毒的降解產物。研究人員為篩選高效降解黃曲霉毒素的菌株，開展了相關的研究。回答下列問題：
（1）配制的富集培養基和初篩平板培養基，常用

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

法進行滅菌。富集培養基的成分：香豆素0.1%、（NH₄）₂SO₄0.5%、NaCl0.85%、pH7.0；初篩平板培養基的成分：香豆素0.1%、（NH₄）₂SO₄0.5%、KH₂PO₄0.25%、MgSO₄0.1%、Na₂HPO₄?12H₂O 0.05%、CaCl₂ 0.01%、瓊脂2%、pH6.5。香豆素可用于篩選目的菌的原因是

香豆素的化學結構與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長而其他微生物生長受到抑制

香豆素的化學結構與黃曲霉毒素的類似，作為唯一碳源可使目的菌能夠生長而其他微生物生長受到抑制

。初篩平板培養基中無機物的主要作用是

提供無機鹽和維持培養基的pH穩定

提供無機鹽和維持培養基的pH穩定

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（2）從霉爛的花生殼、動物糞便中取樣，稀釋后將菌懸液加入到富集培養基中，適宜條件下富集培養三次。將富集培養的菌液用

平板劃線法或稀釋涂布平板

平板劃線法或稀釋涂布平板

法接種到初篩平板培養基上，適宜條件下培養后，挑選

單個菌落直徑較大

單個菌落直徑較大

的菌體進行純化培養。
（3）經多輪篩選后獲得H菌株。搖瓶培養H菌株一段時間后取5mL發酵液進行離心，取950μL離心上清液加入5μL一定濃度的AFB₁液，控制AFB，的終濃度1μg/mL。反應24h后經萃取、溶解、過濾后檢測殘余AFB₁的含量。該實驗還需要在

滅菌的發酵離心上清液

滅菌的發酵離心上清液

中加入等量的AFB₁液作為空白對照。該步驟用于檢測

H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力

H菌株分泌的黃曲霉毒素降解酶的活力

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