腫瘤已成為嚴重危害人類健康的高發(fā)病,主要的治療手段有化療、放療和手術等,而腫瘤細胞對腫瘤藥物產生耐藥性是化療失敗的主要原因之一,研究表明腫瘤細胞耐藥性的產生與過量表達的跨膜轉運蛋白BCRP有關,研究人員嘗試建立穩(wěn)定表達BCRP的細胞系。回答下列問題:
(1)研究人員從人的 癌細胞癌細胞(填“普通體細胞”或“癌細胞”)中提取總RNA,逆轉錄后進行PCR擴增獲得大量BCRP基因。
(2)隨后構建BCRP基因的真核表達載體,研究人員選擇了P質粒作為載體,因為其具有:能被真核細胞識別的啟動子,其作用是 RNA聚合酶識別和結合位點RNA聚合酶識別和結合位點;抗新霉素基因的作用是 便于將含目的基因的細胞篩選出來便于將含目的基因的細胞篩選出來。
(3)通常用兩種酶切割P質粒和BCRP基因的原因是 避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接,將表達載體導入受體細胞的方法是 顯微注射法顯微注射法,該過程的變異類型是 基因重組基因重組。
(4)通過篩選獲得抗新霉素的受體細胞,并對其進行多次檢測,最終獲得能高效表達BCRP的細胞,在培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后分瓶進行 傳代傳代(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng),最終獲得穩(wěn)定的細胞系,推測此細胞系在后續(xù)研究中的用途有 研究能阻止BCRP過量表達的藥物研究能阻止BCRP過量表達的藥物(寫出1點)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】癌細胞;RNA聚合酶識別和結合位點;便于將含目的基因的細胞篩選出來;避免目的基因和載體自身環(huán)化或反向連接;顯微注射法;基因重組;傳代;研究能阻止BCRP過量表達的藥物
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/13 8:0:9組卷:1引用:2難度:0.6
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1.下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是( )
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細胞中檢測到相應的目的基因,則說明基因工程項目獲得成功 C.蛋白質工程需構建基因表達載體,改造后的蛋白質的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內,可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
(2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關基因工程的敘述,正確的是( )
A.質粒上標記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細胞的DNA中才能復制 C.構建表達載體時需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7