孔雀石綠（簡稱MG）是廣泛使用的有機染料，在自然環境中極難降解，容易引起土壤污染，進而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低，含過量MG的固體培養基不透明。
（1）培養基的配制：MG降解菌富集培養基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等，再加MGMG作為唯一碳源。培養基配制好后，需用高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌法進行無菌處理才能后續使用。
（2）MG高效降解菌株的富集：如圖所示，將1.0g土樣接入含上述配制好的培養液的三角瓶中，將三角瓶置于30℃、180r/min搖床中振蕩培養1～2天，此操作的目的是目的菌充分接觸培養液中的營養物質目的菌充分接觸培養液中的營養物質，直至培養液變渾濁后，換瓶重復操作2-3次，以達到富集的目的。
（3）MG高效降解菌株的分離和純化：圖中所示的分離純化細菌的方法是稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法。實驗中初步估測A中細菌細胞數為1.5×109個/mL，若要在圖中每個平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，且每個平板上長出的菌落數約為150個，則應將A中的菌液稀釋106106倍。
（4）MG高效降解菌株的鑒定：將純化獲得的菌種接種于含過量MG的固體培養基（其他營養成分等適宜）上，根據培養基是否出現透明圈透明圈，就可以鑒別出目的菌株，原因是目的菌株通過降解MG生長，使菌落周圍的培養基變透明，出現透明圈目的菌株通過降解MG生長，使菌落周圍的培養基變透明，出現透明圈。
（5）MG高效降解菌株的保存：獲得純凈的菌種后，需要進行菌種的保藏。若需長期保存，可以采用甘油管藏甘油管藏的方法。
【答案】MG；高壓蒸汽滅菌；目的菌充分接觸培養液中的營養物質；稀釋涂布平板法；106；透明圈；目的菌株通過降解MG生長，使菌落周圍的培養基變透明，出現透明圈；甘油管藏
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：62引用：6難度：0.7
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1．回答下列關于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結構有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應選用表中的培養液，針對不選用的其他培養液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產生的酶活力的測定結果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養液配方培養液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數（如圖所示），以期為修復污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ）
發布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環保領域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，并了解其生長規律，進行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養與觀察：一般來說，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度及培養時間），馴化后的脫硫細菌表現出穩定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
（4）探究生長規律：在計數時，計數方法有稀釋涂布平板法和直接計數法．在用稀釋涂布平板法進行計數時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統計的菌落數往往比活菌的實際數目．發布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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