如圖為利用酵母菌“發酵”出新冠病毒疫苗的研發思路；圖中①-⑦表示過程，B處箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點（四種酶的識別序列詳見表），標記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養基中的蔗糖生存。
| 限制酶 | NcoⅠ | SphⅠ | NheⅠ | BamHⅠ |
| 識別序列和切割位點 | 5’-C↓CATGG | 5’-GCATG↓C | 5’-G↓GATCC | 5’-G↓CTAGC |
逆轉錄
逆轉錄
酶先得到S蛋白的cDNA。擴增該分子時，需要已知cDNA兩側的一段核苷酸序列，目的是 以便根據該序列合成引物
以便根據該序列合成引物
，每一輪循環需要依次經過 變性、復性、延伸
變性、復性、延伸
三個階段。（2）為使③過程順利進行，需先使用限制酶
NheⅠ和NcoⅠ
NheⅠ和NcoⅠ
切割質粒B。此處選用兩種限制酶對新冠病毒的S蛋白基因及質粒進行切割的目的是 防止S蛋白基因和載體自身環化，防止S蛋白基因與載體反向連接
防止S蛋白基因和載體自身環化，防止S蛋白基因與載體反向連接
（答出2點即可）。（3）⑤過程主要是對成功導入質粒B的P型酵母菌進行篩選，此過程的主要操作是：
將轉化后的酵母菌接種在以蔗糖為唯一碳源的培養基上進行選擇培養
將轉化后的酵母菌接種在以蔗糖為唯一碳源的培養基上進行選擇培養
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；以便根據該序列合成引物；變性、復性、延伸；NheⅠ和NcoⅠ；防止S蛋白基因和載體自身環化，防止S蛋白基因與載體反向連接；將轉化后的酵母菌接種在以蔗糖為唯一碳源的培養基上進行選擇培養
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優網所有，未經書面同意，不得復制發布。
發布：2024/6/28 8:0:9組卷：2引用：1難度：0.5
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7