GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子，對損傷的神經(jīng)細胞具有營養(yǎng)和保護作用，研究人員構建了GDNF基因的表達載體（如圖1所示），并導入到大鼠神經(jīng)干細胞中，用于細胞基因治療的研究，請回答：
（1）在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細胞的過程中，使用胰蛋白酶的目的是使細胞分散開使細胞分散開；
（2）構建含GCDNF基因的表達載體時，需選擇圖1中的XhoⅠXhoⅠ限制酶進行酶切．
（3）經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有3種：單個載體自連、CDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接（如圖1所示）為鑒定這3種連接方式，選擇HpaⅠ酶和BamⅡ酶對篩選得到的載體進行雙酶切，并對酶切后的DNA片透進行電泳分析，結果如圖2所示，圖中第②②泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的．
（4）將正向連接的表達載體導入神經(jīng)干細胞后，為了檢測GDNF基因是否成功表達，可用相應的抗體抗體與提取的蛋白質雜交，當培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞達到一定密度時，需進行傳代傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于細胞干細胞移植治療實驗．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】使細胞分散開；XhoⅠ；②；抗體；傳代
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：267引用：10難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6