研究人員從土壤中分離獲得能分解纖維素的細菌（A菌），從A菌中提取一種纖維素酶基因（CBHI）并進行PCR擴增，然后與高效表達載體pUT質粒（圖1）連接構建成重組質粒并導入A菌，從而獲得分解纖維素能力更強的工程菌（B菌）。

限制酶	識別序列及酶切位點
BglⅡ	A↓GATCT
BstEⅡ	G↓GTAACC
SacⅠ	G↓AGCTC
MspⅠ	G↓CGG
BamHⅠ	G↓GATCC

（1）CBHⅡ基因兩端需添加相關酶切位點才能與pUT質粒連接，因此在擴增CBHⅡ基因時，需要在兩種引物上分別添加

AGATCT

AGATCT

序列和

GGTAACC

GGTAACC

序列。
（2）為鑒定重組質粒是否構建成功，將重組質粒導入A菌，并將其接種在含

抗生素N

抗生素N

的培養基上培養，然后提取3個不同菌落的質粒分別進行雙酶切驗證將酶切片段和CBHⅡ基因分別進行電泳，結果如下圖2所示。據此分析，菌落

2、3

2、3

中成功導入了重組質粒。
（3）圖3中B鏈為轉錄模板鏈，轉錄時mRNA自身的延伸方向為5′→3′。為了使CBHⅡ基因按照正確的方向與已被酶切的pUT質粒連接，圖中酶切位點1和酶切位點2所對應的酶分別是

BglⅡB、stEⅡ

BglⅡB、stEⅡ

。
（4）為檢測B菌的纖維素分解能力，將含有20%纖維素的培養基分為三組，進行不同處理后，在相同條件下培養一段時間，測定培養基中纖維素含量，結果如圖4所示，則對照組2 的處理為

接種A菌

接種A菌

，說明

B菌分解纖維素能力比A菌更強

B菌分解纖維素能力比A菌更強

。預期該工程菌在處理廢棄物及保護環境方面可能的應用，舉一個實例

降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染

降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染

。