在石油開采過程中，利用表面活性劑可提高采收率。但化學合成表面活性劑的生產和使用，也帶來一定的環境污染。某些微生物可代謝產生生物表面活性劑。擬從含油污水中篩選耐高溫高壓的產生物表面活性劑菌株。
（1）分離能利用石油的耐高溫菌種，流程如圖。
①上述過程所用的培養液應以石油為唯一碳源唯一碳源。
②固體培養基的制備過程包括：計算→稱量→溶化→滅菌滅菌→倒平板。
③圖中A處應采用稀釋涂布稀釋涂布法進行接種。
（2）通過上述分離過程，獲得16個菌株。如何從這些菌株中進一步篩選耐高壓、高產生物表面活性劑的菌種？請寫出基本思路。
（3）菌種鑒定
①根據菌種在平板上形成的菌落菌落的特征，對菌種進行初步鑒定。
②16S rDNA基因存在于所有細菌中，該基因包含多個恒定區和可變區，恒定區序列基本保守，可變區序列具有種的特異性。利用16S rDNA基因的恒定區恒定區（選填“恒定區”或“可變區”）序列設計引物，PCR擴增16SrDNA片段，然后測序，將測序結果與數據庫中相關數據進行比較進而鑒定。
（4）研究者篩選出的菌種BQ-2為好氧菌，但油井深處通常缺氧。現有一耐高溫高壓、不能產生物表面活性劑的厭氧菌DQ-l。請寫出利用這兩個菌株獲取目的菌株的思路。
（5）簡述產生物表面活性劑菌株在石油工業應用的生態學意義。
【答案】唯一碳源；滅菌；稀釋涂布；菌落；恒定區
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：41引用：2難度：0.7
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1．回答下列關于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結構有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應選用表中的培養液，針對不選用的其他培養液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產生的酶活力的測定結果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養液配方培養液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數（如圖所示），以期為修復污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ）
發布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
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（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養與觀察：一般來說，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度及培養時間），馴化后的脫硫細菌表現出穩定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
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