大腸菌群是指一類在35～37℃條件下培養48 h,能發酵乳糖產酸產氣的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌的總稱，大腸桿菌屬于大腸菌群的一種。我國《生活飲用水衛生標準》中關于生活飲用水的細菌標準是：一、細菌總數1 mL水中不超過100個；二、大腸桿菌數1 L水中不超過3個。國標一般采用多管發酵法檢測樣品中大腸菌群數，具體分為三步：

蛋白胨	10.0
牛肉膏	3.0
乳糖	5.0
氯化鈉	5.0
pH	7.3±0.2
H2O	定容至1000 mL

①初發酵試驗：將待測樣品稀釋后，選擇3個稀釋度，每個稀釋度分別接種到5支發酵管中，37℃培養48 h,觀察是否產氣。
②平板分離：將產氣發酵管中的菌液分別接種于伊紅美藍培養基（生長在此培養基上的大腸菌群呈深紫色，有金屬光澤）上，置于37℃恒溫箱內培養24h,觀察菌落形態。
③復發酵試驗：挑取平板上呈深紫色，有金屬光澤的菌落，進行染色鏡檢。將鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株重復初步發酵試驗。最后根據證實為大腸桿菌陽性的管數，按統計學原理即可得出大腸菌群數（每升或每100 毫升中的個數）。
（1）初發酵乳糖蛋白胨培養基配方（g/L）如表所示，按物理性質分類，乳糖蛋白胨培養基屬于

液體

液體

培養基，其中的碳源有

牛肉膏、乳糖

牛肉膏、乳糖

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（2）若檢測飲用水中的大腸桿菌數，則①步驟無須稀釋，原因

飲用水中大腸桿菌數非常少

飲用水中大腸桿菌數非常少

，①步 驟每個稀釋度分別接種到5支發酵管中的原因是

平行重復實驗，減小實驗誤差

平行重復實驗，減小實驗誤差

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（3）②步驟中不能直接用涂布器把菌液涂布在平板上進行大腸菌群計數，原因是

初發酵過程擴大了大腸菌群的數量，若使用涂布法可能由于菌液中細菌數目過多得不到單菌落

初發酵過程擴大了大腸菌群的數量，若使用涂布法可能由于菌液中細菌數目過多得不到單菌落

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（4）伊紅美藍培養基在配制后通常用

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

法進行滅菌，③步驟中只能挑取符合特征的菌落其中的一小部分進行鏡檢，這是因為

鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株還需重復初步發酵試驗，而鏡檢的菌株因為雜菌污染無法使用

鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株還需重復初步發酵試驗，而鏡檢的菌株因為雜菌污染無法使用

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