（一）下列是高產蛋白酶的枯草芽孢桿菌的篩選過程，回答下列問題：
（1）配置脫脂牛奶固體培養基時脫脂牛奶需單獨用 112℃滅菌的原因是 既能將牛奶中的雜菌殺滅又不會過多破壞牛奶中的營養成分既能將牛奶中的雜菌殺滅又不會過多破壞牛奶中的營養成分，推測還可用 過濾滅菌過濾滅菌方法達到相同的目的。配置該培養基還需調節 pH 為 中性偏堿中性偏堿。
（2）取三個不同地點的土樣，用無菌水稀釋。分別取 10-4、10-5、10-6 三個稀釋度涂布到篩選平板中，每個稀釋度做 3 個重復。
（3）將得到的平板 倒置倒置于 30℃恒溫培養箱中培養 24h。觀察平板上的菌落，用接種環挑取 透明圈大的/透明圈直徑與菌落直徑比值大透明圈大的/透明圈直徑與菌落直徑比值大的菌落中的菌種在脫脂牛奶平板上進行劃線分離，以進一步 分離純化分離純化。最后將分離出的單菌落接種到 AA（ A.LB 固體斜面培養基B.LB 固體平板培養基C.馬鈴薯蔗糖斜面培養基D.馬鈴薯蔗糖平板培養基）中，于 30℃恒溫培養箱中培養 24 h 后，放入 4℃冰箱中保存。
（二）番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）是一類單鏈環狀 DNA 病毒，能引發番茄黃化曲葉病。檢測某番茄幼苗是否感染該病毒，實驗人員進行以下操作：①分析 PCR 擴增結果；②從番茄幼苗組織樣本中提取 DNA；③利用 PCR 擴增 DNA 片段；④采集番茄幼苗葉片組織樣本?；卮鹣铝袉栴}：
（1）若要得到正確的檢測結果，正確的操作順序應該是 ④②③①④②③①（用數字序號表示）。
（2）步驟②在番茄研磨液中加入 2mol/L 的氯化鈉，作用是 溶解DNA溶解DNA；研磨液中的乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）的作用是 抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解。
（3）操作③中使用的酶是 Taq DNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）Taq DNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）。PCR 反應中每次循環可分為變性、退火、延伸延伸三步。
（4）PCR 擴增得到的產物進行瓊脂糖凝膠電泳后的結果如圖：
注：M：DNA marker；1-4：空白對照、陰性對照、陽性對照、樣品實驗中，DNA marker 是一組 已知長度和含量的標準DNA片段已知長度和含量的標準DNA片段的混合物，起參照作用。 健康番茄幼苗的DNA健康番茄幼苗的DNA是陰性對照組，TYLCV 的 DNA 是陽性對照組。若想利用該樣品植株獲得無病毒的番茄幼苗，方法是 取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養。
【答案】既能將牛奶中的雜菌殺滅又不會過多破壞牛奶中的營養成分；過濾滅菌；中性偏堿；倒置；透明圈大的/透明圈直徑與菌落直徑比值大；分離純化；A；④②③①；溶解DNA；抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解；Taq DNA聚合酶（耐高溫的DNA聚合酶）；延伸；已知長度和含量的標準DNA片段；健康番茄幼苗的DNA；取莖尖、芽尖等幼嫩組織部位進行植物組織培養
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：1難度：0.6
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1．回答下列關于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結構有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．擬核 D．莢膜
（2）表中培養液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應選用表中的培養液，針對不選用的其他培養液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產生的酶活力的測定結果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養液配方培養液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數（如圖所示），以期為修復污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />
發布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環保領域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，并了解其生長規律，進行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養基上，待長出菌落后再重復上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養與觀察：一般來說，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度及培養時間），馴化后的脫硫細菌表現出穩定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
（4）探究生長規律：在計數時，計數方法有稀釋涂布平板法和直接計數法．在用稀釋涂布平板法進行計數時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統計的菌落數往往比活菌的實際數目．發布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5