高粱是我國重要的糧食作物，但其賴氨酸含量較低。天冬氨酸激酶（AK）和二氫吡啶羧酸合酶（DHPS）是賴氨酸合成途徑中兩種重要的酶，并協同控制植物中游離賴氨酸的合成速率。科學家把來源于細菌的外源AK和DHPS基因與胚乳特異性啟動子導入高粱，獲得游離賴氨酸含量顯著增加的高粱植株。請回答相關問題。
（1）構建基因表達載體過程中，選用兩種限制酶同時處理目的基因和質粒，其優點是 目的基因和質粒的正向連接，避免發生質粒和目的基因的自連和反向連接目的基因和質粒的正向連接，避免發生質粒和目的基因的自連和反向連接，構建基因表達載體還需要的工具酶是 DNA連接酶DNA連接酶。AK基因和DHPS基因上游的胚乳特異性啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別結合的位點，驅動基因轉錄。
（2）將目的基因導入高粱細胞最常用的方法是 花粉管通道法花粉管通道法，目的基因進入受體細胞后需要 植物組織培養植物組織培養利用技術才能獲得轉基因植株。
（3）目的基因的檢測與鑒定，用PCR技術檢測轉基因植株中目的基因是否成功轉錄出mRNA，首先從轉基因高粱植株的 胚乳細胞胚乳細胞中提取mRNA，然后通過 逆轉錄逆轉錄得到cDNA，然后進行PCR擴增，圖1是對擴增產物電泳的結果，植株 4、5、74、5、7（填數字）中AK基因和DHPS基因都轉錄成功。
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（4）圖2為野生高粱細胞內賴氨酸合成與分解代謝的部分過程。細菌基因編碼的AK和DPHS對賴氨酸濃度不敏感，據此分析轉基因植株賴氨酸含量較高的原因 基因編碼的AK和DPHS對賴氨酸濃度不敏感，因而賴氨酸合成過程不會因為賴氨酸含量上升而被抑制基因編碼的AK和DPHS對賴氨酸濃度不敏感，因而賴氨酸合成過程不會因為賴氨酸含量上升而被抑制。LKR和SDH是賴氨酸分解代謝的關鍵酶，據此再提出一點利用基因工程思路提高高粱賴氨酸含量的方法是 設法改造或敲除控制LKR合成的相關基因，從而減少賴氨酸的分解過程，進而提高賴氨酸的含量設法改造或敲除控制LKR合成的相關基因，從而減少賴氨酸的分解過程，進而提高賴氨酸的含量。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因和質粒的正向連接，避免發生質粒和目的基因的自連和反向連接；DNA連接酶；RNA聚合酶；花粉管通道法；植物組織培養；胚乳細胞；逆轉錄；4、5、7；基因編碼的AK和DPHS對賴氨酸濃度不敏感，因而賴氨酸合成過程不會因為賴氨酸含量上升而被抑制；設法改造或敲除控制LKR合成的相關基因，從而減少賴氨酸的分解過程，進而提高賴氨酸的含量
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/27 8:0:9組卷：5引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6