由指狀青霉引起的綠霉病是柑橘采摘后最具破壞性的病害，使用拮抗微生物是防治柑橘綠霉病的有效手段?？蒲腥藛T期望從海洋中篩選到產特殊抑菌活性物質的拮抗菌株。請回答下列問題：
（1）在實驗室培養微生物時，通常需要對所需的玻璃器皿進行滅菌，滅菌的方法有 高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法（答出兩種）。
（2）科研人員利用稀釋涂布平板法初步從海泥中分離海洋微生物，該方法大致分為三個步驟：①取10g海泥，加入裝有90mL 無菌水無菌水的三角瓶中混合均勻，梯度稀釋到104倍；②吸取103倍、104倍稀釋液涂布在固體培養基固體培養基（填“固體培養基”或“液體培養基”）的表面；③28℃培養至菌落出現。培養過程中可對微生物進行計數，選取菌落數目穩定時的記錄作為結果，這樣做的目的是 防止因培養時間不足而遺漏菌落的數目防止因培養時間不足而遺漏菌落的數目。
（3）挑取單菌落進行劃線純化3次。挑取菌落前，接種環灼燒后需冷卻，冷卻的目的是 防止溫度過高殺死菌種防止溫度過高殺死菌種。將純化的單菌落接種到液體培養基中培養，若要對菌種進行長期保存，可以采用甘油管藏的方法，具體的操作是在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌，將1mL菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌，將1mL菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存。
（4）將初篩獲得的對指狀青霉具有拮抗效果的海洋細菌接種于液體培養基中發酵培養，設計實驗驗證其產生的抑菌活性物質的抑菌效果。實驗組中加入適量的發酵上清液，對照組應加入 等量未接種海洋細菌的液體培養基等量未接種海洋細菌的液體培養基，然后兩組分別接種等量的指狀青霉，一段時間后，觀察其生長狀況。
【答案】高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法；無菌水；固體培養基；防止因培養時間不足而遺漏菌落的數目；防止溫度過高殺死菌種；在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌，將1mL菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存；等量未接種海洋細菌的液體培養基
【解答】
【點評】
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