自然界中有很多種微生物，尚未能分離純化培養(yǎng)，科研人員開發(fā)了新的微生物分離 技術(shù)以篩選微生物。
（1）配制培養(yǎng)基并分離微生物的步驟是：計算計算→稱量稱量→溶化溶化→調(diào)pH調(diào)pH→（高壓蒸汽）滅菌（高壓蒸汽）滅菌→倒平板倒平板→接種接種→培養(yǎng)。篩選微生物的一般思路是，根據(jù)表型特征利用 選擇選擇培養(yǎng)基進行篩選。
（2）若某種微生物沒有明顯表型特征時，就無法通過上述方法篩選，科研人員通過圖所示的流程進行篩選。
①據(jù)圖分析，科研人員利用目標微生物編碼膜蛋白的 基因序列基因序列，構(gòu)建表達載體，并導(dǎo)入用 CaCl2CaCl2處理的大腸桿菌細胞中，獲取大量膜蛋白。
②用獲取的膜蛋白作為抗原，利用兔子制備單克隆抗體的具體流程是：用膜蛋白作為抗原多次免疫兔子，取脾臟中的B淋巴細胞（或漿細胞）與骨髓瘤細胞融合，篩選得到單個分泌抗膜蛋白抗體的雜交瘤細胞，進行克隆培養(yǎng)用膜蛋白作為抗原多次免疫兔子，取脾臟中的B淋巴細胞（或漿細胞）與骨髓瘤細胞融合，篩選得到單個分泌抗膜蛋白抗體的雜交瘤細胞，進行克隆培養(yǎng)。
（3）將上述帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合，目的是 標記標記目標微生物。用流式細胞儀分離不同熒光強度的細胞，結(jié)果如圖2所示。對結(jié)果進行比較，應(yīng)從區(qū)域 ②②（選填圖中數(shù)字）的細胞中篩選目標微生物。
【答案】計算；稱量；溶化；調(diào)pH；（高壓蒸汽）滅菌；倒平板；接種；選擇；基因序列；CaCl2；用膜蛋白作為抗原多次免疫兔子，取脾臟中的B淋巴細胞（或漿細胞）與骨髓瘤細胞融合，篩選得到單個分泌抗膜蛋白抗體的雜交瘤細胞，進行克隆培養(yǎng)；標記；②
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：28引用：1難度：0.6
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1．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定．
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細菌，并了解其生長規(guī)律，進行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細菌：將篩選出的脫硫細菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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