法尼醇X受體（FXR）又稱膽汁酸受體，研究表明，F(xiàn)XR在調(diào)節(jié)肝臟再生和抑制肝臟腫瘤方面發(fā)揮了關(guān)鍵作用。斑馬魚具有與人類高度相似的基因組，其胚胎和幼魚身體透明，在毒理學和藥理學研究方面有其獨特優(yōu)勢。研究人員建立模型動物，用于FXR相關(guān)藥物篩選，請回答下列問題：
（1）已知XhoⅠ酶識別的序列具有回文對稱的特點（即一條鏈從左向右讀和另一條鏈從右向左讀的序列是相同的），若一段核苷酸序列為“-ATCTCGACCGGG-”，則對該段核苷酸序列進行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個核苷酸）為 —CTCGAG——CTCGAG—；限制酶破壞的鍵為 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
（2）圖為NR1H4基因的兩種引物序列，要將XhoⅠ酶和BamHⅠ酶的酶切位點添加到NR1H4基因兩端，加入限制酶酶切位點的位置應在圖中的 ①③①③（填序號）處；進行PCR擴增，經(jīng)過 33輪循環(huán)后，可得到兩端帶酶切位點的目的基因片段。
（3）將重組質(zhì)粒導入用 Ca2+Ca2+處理過的大腸桿菌體內(nèi)，擴大培養(yǎng)后，提取質(zhì)粒。再將重組質(zhì)粒借助 顯微注射儀顯微注射儀（填儀器名稱）注入斑馬魚 受精卵受精卵細胞內(nèi)。
（4）在重組質(zhì)粒上，含有氨芐青霉素抗性基因和增強綠色熒光蛋白基因。在斑馬魚培養(yǎng)過程中，應以 增強綠色熒光蛋白基因增強綠色熒光蛋白基因作為標記基因篩選出肝臟中特異性表達的個體；斑馬魚在此實驗中作為模型動物方便進行篩選，原因是 斑馬魚胚胎和幼魚身體透明，可直接觀察肝臟的熒光斑馬魚胚胎和幼魚身體透明，可直接觀察肝臟的熒光。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】—CTCGAG—；磷酸二酯鍵；①③；3；Ca2+；顯微注射儀；受精卵；增強綠色熒光蛋白基因；斑馬魚胚胎和幼魚身體透明，可直接觀察肝臟的熒光
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：0引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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