普通番茄細胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制細胞產生多聚半乳糖醛酸酶，該酶能破壞細胞壁，使番茄軟化，不耐貯藏。科學家將抗多聚半乳糖醛酸酶基因導入番茄細胞，培育出了抗軟化、保鮮時間長的轉基因番茄。目的基因和質粒（含卡那霉素抗性基因KmR）上有 PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ四種限制酶切割位點，操作流程如下圖所示。請分析回答下列問題：
（1）本實驗的目的基因指的是抗多聚半乳糖醛酸酶基因抗多聚半乳糖醛酸酶基因，在構建重組質粒時，為了確保目的基因和質粒定向連接，應該選用的限制酶是SmaⅠ和PstⅠSmaⅠ和PstⅠ。若用 PstⅠ和AluⅠ切割重組質粒，則完全酶切后將會出現33個序列不同的DNA片段。
（2）要利用培養基篩選已導入目的基因的番茄細胞，培養基中應加入卡那霉素卡那霉素。圖中步驟①→②所示技術的生物學原理是細胞的全能性細胞的全能性。
（3）據圖中轉基因番茄細胞中的信息傳遞過程可知，由于mRNA1和mRNA2相結合mRNA1和mRNA2相結合而直接阻礙了多聚半乳糖醛酸酶基因表達時的翻譯翻譯過程，最終使番茄獲得抗軟化的性狀。
（4）如果利用上述方法培育出的番茄不具抗軟化性狀，經分子雜交技術檢測，發現細胞內有目的基因存在，但檢測不到mRNA1分子，可能原因是目的基因上游缺少啟動子啟動子。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】抗多聚半乳糖醛酸酶基因；SmaⅠ和PstⅠ；3；卡那霉素；細胞的全能性；mRNA1和mRNA2相結合；翻譯；啟動子
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：2難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6