黃瓜花葉病毒（CMV）是能侵染多種植物的RNA病毒，可危害番茄的正常生長并造成減產。研究人員通過農桿菌介導將該病毒外殼蛋白的cDNA導入番茄植株中，成功獲得抗CMV的番茄植株。
（1）獲得CMV的RNA后，需在逆轉錄逆轉錄酶的催化下才能合成CMV外殼蛋白的cDNA。
（2）獲得cDNA后，需先通過一定方法將其插入到農桿菌Ti質粒的T-DNAT-DNA片段中，然后將番茄子葉切段與該農桿菌共同培養，以實現對番茄細胞的轉化。
（3）將經共同培養后的番茄外植體接種于含有卡那霉素和青霉素的選擇培養基上培養一段時間，只有部分外植體生出愈傷組織。研究人員據此確定這些生出愈傷組織的外植體都已成功導入了cDNA，你認為他們做出以上判斷的理由是重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導入了重組質粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養基上生出愈傷組織重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導入了重組質粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養基上生出愈傷組織。愈傷組織經再分化再分化長出小芽后還需要轉入生根培養基生根培養基誘導生根。
（4）要想確定轉基因番茄已經成功表達出CMV外殼蛋白，需要進行抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交實驗。
（5）研究人員用強致病力的CMV分別感染轉基因番茄與未轉基因的番茄未轉基因的番茄，通過對照發現轉基因番茄具有較好的抗CMV能力。轉基因番茄自交，子代中抗性植株與敏感植株數量之比接近3：1，由此可以得出的結論是目的基因已經整合到受體細胞的染色體上目的基因已經整合到受體細胞的染色體上；獲得的轉基因親本為雜合子獲得的轉基因親本為雜合子（答出兩點）。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；T-DNA；重組表達載體同時含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因，只有成功導入了重組質粒的外植體才能在含有卡那霉素和青霉素的選擇培養基上生出愈傷組織；再分化；生根培養基；抗原-抗體雜交；未轉基因的番茄；目的基因已經整合到受體細胞的染色體上；獲得的轉基因親本為雜合子
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：9引用：3難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6