回答下列有關遺傳信息傳遞與表達的問題。
野生型大腸桿菌(E.coli)具有完整的LacZ基因,該基因編碼的β-半乳糖苷酶由α片段和ω片段兩部分組成,兩部分均存在時可將無色化合物X-gal“切割”成半乳糖和深藍色的物質5-溴-4-靛藍,從而使整個菌落變為藍色。DH5α是基因工程中常用的一種大腸桿菌誘變菌株,對氨芐青霉素敏感,其LacZ基因中編碼ω片段的序列仍然保留,但編碼α片段的序列缺失。
(1)LacZ基因控制β-半乳糖苷酶合成的過程主要包括 轉錄轉錄和 翻譯翻譯兩個環節。
(2)某研究小組構建了質粒pXY-1,如圖甲所示,該質粒含氨芐青霉素抗性基因Ampr和編碼大腸桿菌β-半乳糖苷酶α片段的基因片段LacZ。圖乙顯示的則是NasⅠ、HpaⅡ和KasⅠ三種限制酶的識別序列(↓表示切割位點)。若以該質粒作為運載體,將外源目的基因(圖丙)導入大腸桿菌DH5α菌株,在構建重組質粒時應選用的限制酶是 KasKasⅠKasKasⅠ。此外,還需用到的另一種酶是 DNA連接酶DNA連接酶。

(3)(不定項)若用含有氨芐青霉素和X-gal的固體培養基篩選導入了pXY-1質粒的DH5α大腸桿菌,下列說法正確的是 BCBC。
A.沒有導入任何質粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養基上生長且菌落為白色
B.導入了pXY-1空載體質粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養基上生長且菌落為藍色
C.導入了pXY-1重組質粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養基上生長且菌落為白色
D.導入了pXY-1重組質粒的DH5α大腸桿菌可以在該培養基上生長且菌落為藍色
(4)現從(3)中的固體培養基平板上挑取一個重組菌落,經擴大培養后提取質粒,分別用不同的限制酶處理并對酶切產物進行瓊脂糖凝膠電泳,結果如表所示:
所用限制性內切酶 | 所得條帶長度 |
BamHⅠ、ScaⅠ雙酶切 | 1230bp、2770bp |
HpaⅡ、ScaⅠ雙酶切 | 460bp、1240bp、xbp |
900
900
bp,在其內部存在 HpaHpaⅡ
HpaHpaⅡ
(填限制酶名稱)的切割位點,表中字母x代表的數值應為 2300
2300
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】轉錄;翻譯;KasKasⅠ;DNA連接酶;BC;900;HpaHpaⅡ;2300
【解答】
【點評】
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發布:2024/7/9 8:0:8組卷:3引用:1難度:0.6
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