CD47是一種免疫抑制蛋白，腫瘤細胞通過過量表達CD47抑制巨噬細胞的吞噬作用以實現(xiàn)免疫逃逸。抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，其制備流程如圖甲所示。
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（1）制備過程中需要用CD47對小鼠進行多次處理，目的是 獲得較多的已免疫（對CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細胞獲得較多的已免疫（對CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細胞。為保證細胞培養(yǎng)環(huán)境無菌、無毒，需要進行的相關(guān)操作是 對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理；保證在無菌環(huán)境下進行操作；定期更換培養(yǎng)液對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理；保證在無菌環(huán)境下進行操作；定期更換培養(yǎng)液。
（2）圖乙表示核苷酸合成的兩條途徑，物質(zhì)A可以阻斷全合成途徑，轉(zhuǎn)化酶和激酶是補救合成途徑所必需的兩種酶。正常細胞中含有轉(zhuǎn)化酶和激酶，骨髓瘤細胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶。已知圖甲的篩選1利用的是加入了H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”，其篩選得到是 雜交瘤雜交瘤細胞，該細胞能在HAT培養(yǎng)基中存活并增殖的原因是 HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細胞含有從B細胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過補救合成途徑來合成核苷酸，同時又具備骨髓瘤細胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細胞含有從B細胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過補救合成途徑來合成核苷酸，同時又具備骨髓瘤細胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖；經(jīng)篩選2獲得的細胞的特點是 既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體。
（3）為驗證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，研究人員設(shè)計如下實驗，實驗組：將抗CD47的單克隆抗體加入巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養(yǎng)系中，檢測巨噬細胞的吞噬指數(shù)（與被吞噬腫瘤細胞的比例呈正相關(guān)）；對照組為 不加單克隆抗體的巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養(yǎng)系不加單克隆抗體的巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養(yǎng)系，預(yù)期實驗結(jié)果：對照組巨噬細胞的吞噬指數(shù)顯著低于實驗組對照組巨噬細胞的吞噬指數(shù)顯著低于實驗組。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】獲得較多的已免疫（對CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細胞；對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理；保證在無菌環(huán)境下進行操作；定期更換培養(yǎng)液；雜交瘤；HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細胞含有從B細胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過補救合成途徑來合成核苷酸，同時又具備骨髓瘤細胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖；既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體；不加單克隆抗體的巨噬細胞和腫瘤細胞的共培養(yǎng)系；對照組巨噬細胞的吞噬指數(shù)顯著低于實驗組
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/20 8:0:8組卷：11引用：2難度：0.6
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1．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6～5倍，導(dǎo)致吞噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
2．使用高效的細胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞但細胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用。抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細胞毒素）三部分組成，它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7 -
3．雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細胞技術(shù)（免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題：
（1）與植物體細胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長。
（2）對③篩選出的雜交瘤細胞，還需進行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點是（答出一點）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細胞。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細胞會因為、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5
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