中國科學家運用合成生物學方法構建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖）為原料，在實驗室發酵生產PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價值。工藝流程如圖。

回答下列問題：
（1）為提高菌株H對蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液體培養基中將蔗糖作為

唯一碳源

唯一碳源

，并不斷提高其濃度，經多次傳代培養（指培養一段時間后，將部分培養物轉入新配的培養基中繼續培養）以獲得目標菌株。培養過程中定期取樣并用

稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法

的方法進行菌落計數，評估菌株增殖狀況。此外，選育優良菌株的方法還有

誘變育種、基因工程育種

誘變育種、基因工程育種

（答出兩種方法即可）等。
（2）基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強等特性，研究人員設計了一種不需要滅菌的發酵系統，其培養基鹽濃度設為60g/L，PH為10，菌株H可正常持續發酵60d以上。該系統不需要滅菌的原因是

鹽濃度為60g/L的條件下，其他雜菌因失水過多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長繁殖受抑制

鹽濃度為60g/L的條件下，其他雜菌因失水過多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長繁殖受抑制

（答出兩點即可）。
（3）研究人員在工廠進行擴大培養，在適宜的營養物濃度、溫度、PH條件下發酵，結果發現發酵液中菌株H細胞增殖和PHA產量均未達到預期，并產生了少量乙醇等物質，這說明發酵條件中，

氧氣（O₂或溶解氧）

氧氣（O₂或溶解氧）

可能是高密度培養的限制因素。發酵工程的中心環節是

發酵罐內發酵

發酵罐內發酵

。
（4）菌株H還能通過分解餐廚垃圾（主要含蛋白質、淀粉、油脂等）來生產PHA，說明其能分泌

蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等

蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等

。