Ⅰ型糖尿病是因免疫系統將自身胰島素作為抗原識別而引起的自身免疫病。小腸黏膜長期少量吸收胰島素抗原，能誘導免疫系統識別該抗原后應答減弱，從而緩解癥狀。科研人員利用Ⅰ型糖尿病模型小鼠進行動物實驗，使乳酸菌在小鼠腸道內持續產生人胰島素抗原，為此構建重組表達載體，技術路線如圖1。
據圖回答：
（1）為使人胰島素在乳酸菌中高效表達，需改造其編碼序列。圖2是改造前后人胰島素B鏈編碼序列的起始30個核苷酸序列。據圖分析，轉錄形成的mRNA中，該段序列所對應的片段內存在堿基替換的密碼子數有 66個。
（2）在人胰島素A、B肽鏈編碼序列間引入一段短肽編碼序列，確保等比例表達A、B肽鏈。下列有關分析正確的是 ABCDABCD。
A．引入短肽編碼序列不能含終止子序列
B．引入短肽編碼序列不能含終止密碼子編碼序列
C．引入短肽不能改變A鏈氨基酸序列
D．引入短肽不能改變原人胰島素抗原性
（3）在重組表達載體中，SacⅠ和XbaⅠ限制酶僅有圖示的酶切位點。用這兩種酶充分酶切重組表達載體，可形成 33種DNA片段。質粒載體作為基因工程的工具，應具備的基本條件有 ①自我復制；②帶有特殊的標記基因③具有一個至多個限制酶切點①自我復制；②帶有特殊的標記基因③具有一個至多個限制酶切點（答出兩點即可）
（4）檢測轉化的乳酸菌發現，信號肽—重組人胰島素分布在細胞壁上。由此推測，信號肽的合成和運輸所經歷的細胞結構依次是 核糖體、細胞質基質、細胞膜、細胞壁核糖體、細胞質基質、細胞膜、細胞壁。
（5）Ⅰ型糖尿病也可以通過核移植技術進行治療。目前核移植技術中普遍使用的去核方法是 顯微操作顯微操作法，還有人采用梯度離心，紫外光短時間照射、化學物質處理等方法，這些方法是在沒有刺破透明帶或卵母細胞質膜的情況下，去除細胞核或使卵細胞核 DNA變性DNA變性，從而達到去核的目的。
【答案】6；ABCD；3；①自我復制；②帶有特殊的標記基因③具有一個至多個限制酶切點；核糖體、細胞質基質、細胞膜、細胞壁；顯微操作；DNA變性
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：21引用：3難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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