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          營養缺陷型菌株是指野生型菌株經過人工誘變或自然突變失去合成某種營養的能力,只有在基本培養基中補充所缺乏的營養因子后才能生長的菌株,包括氨基酸缺陷型菌株、維生素缺陷型菌株和堿基缺陷型菌株等。篩選營養缺陷型菌株的常規步驟為:誘變育種→淘汰野生型→檢出缺陷型→鑒定缺陷型。
          (1)用紫外線誘變大腸桿菌,誘變后常采用選擇培養基淘汰野生型大腸桿菌,使營養缺陷型大腸桿菌得以富集。培養大腸桿菌時,需將培養基的pH調至
          中性或弱堿
          中性或弱堿
          性,再在壓力和溫度分別為
          100kPa,121℃
          100kPa,121℃
          的條件下進行高壓蒸汽滅菌。
          (2)夾層平板培養法可用于營養缺陷型菌株的檢出,其原理如圖1所示,先在培養皿上倒一薄層基本培養基,凝固后再接種一層誘變處理的菌液,其上再澆一層基本培養基,凝固后放入
          恒溫培養箱
          恒溫培養箱
          中培養出菌落,再倒一層完全培養基繼續培養。若結果如圖2所示,其中菌落
          B
          B
          (填“A”或“B”)即為檢出的營養缺陷型大腸桿菌菌株。

          (3)研究小組一利用生長圖譜法初步確定檢出的營養缺陷型大腸桿菌的類型,即在基本培養基乙的A~E這5個區域中分別添加不同的營養物質,然后用
          稀釋涂布平板法
          稀釋涂布平板法
          法將檢出的營養缺陷型大腸桿菌接種在圖3培養基上,若培養一段時間后在圖3的BC交界處長出了菌落,則說明該菌株是
          ab
          ab

          a.氨基酸缺陷型菌株
          b.維生素缺陷型菌株
          c.堿基缺陷型菌株
          (4)研究小組二用上述方法鑒定了某菌株屬于維生素營養缺陷型,為了進一步確定該菌株的具體類型,他們把15種維生素按照不同組合分為5個小組,用5個濾紙片分別蘸取不同小組的維生素,然后覆于接種后的瓊脂平板上培養一段時間。
          組別 維生素組合
          1 維生素A 維生素B1 維生素B2 維生素B6 維生素B12
          2 維生素C 維生素B1 維生素D2 維生素E 煙酰胺
          3 葉酸 維生素B2 維生素D2 膽堿 泛酸鈣
          4 對氨基苯甲酸 維生素B6 維生素E 膽堿 肌醇
          5 生物素 維生素12 煙酰胺 泛酸鈣 肌醇
          若觀察到1組和2組濾紙片周圍產生生長圈(圖4),則該營養缺陷型大腸桿菌不能合成的維生素是
          維生素B1
          維生素B1
          ;若菌株為葉酸和生物素的雙營養缺陷型大腸桿菌,則其在圖4培養基上形成菌落的位置是
          3與5的交界處
          3與5的交界處

          【答案】中性或弱堿;100kPa,121℃;恒溫培養箱;B;稀釋涂布平板法;ab;維生素B1;3與5的交界處
          【解答】
          【點評】
          聲明:本試題解析著作權屬菁優網所有,未經書面同意,不得復制發布。
          發布:2024/8/8 8:0:9組卷:11引用:2難度:0.6
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            (1)為獲得單菌落,可采用平板劃線法或
             
            法將初篩菌液接種在
             
            培養基上.46SM01菌落為粉白色,初期呈突起絮狀,在顯微鏡下觀察到,菌絲白色致密,且有分生孢子,細胞核直徑約1μm,初步推測為真菌,則其特征中,最能說明SM01是真菌的是有細胞核,且有分生孢子.SM01還一定具有的結構有(多選)
             

            A.細胞膜    B.核糖體    C.擬核    D.莢膜
            (2)表中培養液pH均為6.0,若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定,則應選用表中的
             
            培養液,針對不選用的其他培養液,分別說明原因:
            ①缺少
             
            ,SM01不能很好生長
            ②具有
             
            ,會影響對SM01自身產生的酶活力的測定結果
            ③缺乏
             
            ,會影響SM01的生長,也無法對阿拉伯膠酶活力進行測定.
            表 試驗用培養液配方
             培養液 阿拉伯膠  阿拉伯膠酶   NaNO3  牛肉膏  K2SOPO4  MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
             
             A
             25g/L
             __  __  __
             g/L

             g/L

             g/L
             g/L
             B
             25g/L

             g/L
             __
             g/L

             g/L

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             C  __  __
             g/L
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             g/L

             g/L

             g/L

             g/L
             D
             25g/L
             __
             g/L
             __
             g/L

             g/L

             g/L

             g/L

            發布:2025/1/2 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.5
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            的脫硫細菌.
            (3)培養與觀察:一般來說,在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度及培養時間),馴化后的脫硫細菌表現出穩定的
             
            特征.用高倍顯微鏡
             
            (填“可以”或“不可以”)觀察到脫硫細菌的核糖體.
            (4)探究生長規律:在計數時,計數方法有稀釋涂布平板法和
             
            直接計數法.在用稀釋涂布平板法進行計數時,當樣品的稀釋度足夠高時,培養基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的
             
            ;通過統計平板上的菌落數,就能推測出樣品中大約含有多少活菌,通常推測統計的菌落數往往比活菌的實際數目
             

            發布:2025/1/1 8:0:2組卷:6引用:2難度:0.5
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