赤霉素與其受體GID結合后，可以促進植物莖稈伸長。藍光能夠激活藍光受體CRY，抑制赤霉素的作用，為探究該機理，研究者分別構建了含有His-CRY和GST-GID融合基因的表達載體，表達出相應的融合蛋白。His和GST均為短肽，它們與其他蛋白形成的融合蛋白能與His或GST抗體結合，且不影響其他蛋白的結構和功能。

（1）構建含上述融合基因的表達載體。
①結合圖1分析，欲使His短肽連在CRY的氨基酸序列前面（氨基端），則應在

F引物

F引物

（填“F引物”或“R引物”）的5′端加上His短肽的編碼序列。
②為使融合基因能與載體相連接，還需在F引物和R引物上添加相應的酶切位點序列，該序列應該位于His短肽編碼序列的

5′

5′

（填“5′”或“3′”）端。
③用同樣的方法擴增CST-GID融合基因，并構建相關表達載體。
（2）將兩個表達載體同時導入擬南芥細胞，一段時間后裂解細胞，將含有His抗體的磁珠加入裂解液中，充分孵育后收集磁珠，將磁珠上的蛋白（磁珠蛋白）分離下來，進行抗原抗體雜交，結果如圖2。
①對細胞裂解液蛋白進行抗原—抗體雜交的目的是確定His-CRY和GST-GID這兩個融合基因在擬南芥細胞已正常

表達

表達

。對磁珠蛋白進行His抗體檢測的目的是確定磁珠上的His抗體可以結合

His短肽

His短肽

。
②圖示結果說明，藍光的作用機理是光激活CRY后，CRY與

赤霉素受體GID

赤霉素受體GID

結合，使赤霉素無法發揮作用，從而抑制赤霉素的作用。