重疊延伸PCR技術(shù)是采用具有互補(bǔ)末端的引物，使PCR產(chǎn)物形成了重疊鏈，從而在隨后的擴(kuò)增反應(yīng)中通過重疊鏈的延伸，將不同來源的擴(kuò)增片段重疊拼接起來的技術(shù)，可通過定點誘變在體外改造DNA分子，并將改造后的目的基因?qū)胭|(zhì)粒構(gòu)建目的基因表達(dá)載體。
（1）如圖所示的重疊延伸PCR技術(shù)中，PCR1的引物是 引物A、引物C引物A、引物C。PCR4可獲得大量定點誘變目的基因，此時的引物為 引物C、引物D引物C、引物D。PCR3時模板DNA不能選擇DNA分子③的原因是 子鏈的延伸方向只能從5’→3'，以DNA分子③作模板時子鏈不能延伸子鏈的延伸方向只能從5’→3'，以DNA分子③作模板時子鏈不能延伸。
（2）為使重疊延伸PCR技術(shù)改造后的目的基因（該基因序列不含圖中限制酶的識別序列）能與載體正確連接，PCR4時，應(yīng)在基因上、下游引物的 5′5′端分別添加限制酶 KpnⅠ、EcoRⅠKpnⅠ、EcoRⅠ的酶切位點。
（3）將目的基因、質(zhì)粒及大腸桿菌混合，溫育一段時間后涂在含四環(huán)素的平板上培養(yǎng)，一段時間后平板上長出菌落。這些菌落的菌體內(nèi) 不一定不一定（填“一定”、“不一定”）含有目的基因，理由是 含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長。
【答案】引物A、引物C；引物C、引物D；子鏈的延伸方向只能從5’→3'，以DNA分子③作模板時子鏈不能延伸；5′；KpnⅠ、EcoRⅠ；不一定；含有空白質(zhì)粒的大腸桿菌也能在該培養(yǎng)上生長
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：50引用：2難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）。可利用定點突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為。科研人員通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：4引用：3難度：0.7
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