現有重組質粒甲(共含2686個堿基對,不含T-DNA)和乙,為避免基因反接,研究人員用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割重組質粒甲、乙,再利用所得片段構建了重組質粒丙(如圖所示),然后采用農桿菌轉化法將丙導入胡蘿卜愈傷組織細胞。培養后得到轉VP1基因胡蘿卜植株。請回答:
(1)構建重組質粒丙的目的是將VP1基因插入到T-DNAT-DNA中,從而使VP1基因進入植物細胞后,能整合到染色體的DNA上。利用重組質粒甲、乙構建丙的過程中,用到的工具酶是限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶。
(2)將重組質粒甲、乙和丙進行分組,每組只含其中一種重組質粒,同時用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割,結果如表所示:
組別 | 切割后所得DNA片段的情況 |
第1組 | 只得到含有2146和540個堿基對的2種DNA片段 |
第2組 | 只得到含有540和12400個堿基對的2種DNA片段 |
第3組 | 只得到含有12400和1000個堿基對的2種DNA片段 |
0
0
個游離的磷酸基團,限制酶Ⅰ在重組質粒甲中有1
1
個切割位點,表中第2
2
組是切割重組質粒丙的結果。(3)在植物組織培養過程中需要無菌操作,因此對外植體(離體的組織塊)要進行
消毒
消毒
處理。用于培養外植體的培養基不適用于培養胚狀體,原因是培養基中添加的植物激素(植物生長調節劑)的種類和含量比例有所不同
培養基中添加的植物激素(植物生長調節劑)的種類和含量比例有所不同
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】T-DNA;限制酶Ⅰ、Ⅱ和DNA連接酶;0;1;2;消毒;培養基中添加的植物激素(植物生長調節劑)的種類和含量比例有所不同
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:15引用:1難度:0.7
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