矮化育種能使水稻等作物品種具有抗倒伏和高產的優良特性，但同時會引起所育品種的氮肥利用率降低。研究發現，提高NGR5基因表達量既能保持矮化特征，又可以提高氮肥的利用率。為了進一步研究NGR5蛋白提高氮肥利用率的作用機制，研究人員利用酵母菌進行相關實驗?；卮鹣铝袉栴}。
（1）酵母菌需要轉錄因子（一類蛋白質）才能開始轉錄過程，某種轉錄因子由BD（DNA 結合結構域）和 AD（轉錄激活結構域）兩部分組成，在具備相應條件時，BD與AD會靠攏并結合，激活特定基因的轉錄。據此推測，BD能識別特定基因前段的 堿基序列堿基序列 并與之結合，但不能激活轉錄過程，
（2）研究人員將NGR5基因連接到含有編碼BD多肽基因的表達載體中，隨后使用一定方法處理酵母菌細胞，并將該表達載體導入其中，使其能表達 BD-NGR5融合蛋白BD-NGR5融合蛋白。
（3）提取水稻根部細胞的RNA，通過 PCR擴增PCR擴增 過程獲得大量的各種cDNA，隨后將不同的cDNA片段連接到含有編碼AD多肽基因的表達載體中，并導入上述酵母菌細胞，使其能表達不同的AD-Xn融合蛋白（“Xn”表示不同cDNA片段表達的多肽）。
（4）若Xn能與NGR5蛋白相互作用，則AD-Xn融合蛋白和BD-NGR5融合蛋白就會被牽引靠攏，促使BD與AD結合，激活標記基因的表達。這能使酵母菌將培養基中的某特殊物質轉化為藍色，因此可選擇 變藍變藍 的菌落進行繼續研究。
（5）為尋找能與NGR5蛋白相互作用的蛋白質，研究人員最終完成的實驗如表所示，設置3個對照組的目的分別是 確保BD與AD之間、BD-NGR5與AD之間、BD與AD-Xn之間不會相互作用確保BD與AD之間、BD-NGR5與AD之間、BD與AD-Xn之間不會相互作用。
| 組別 | 表達的蛋白（多肽）1 | 表達的蛋白（多肽）2 |
| 對照組1 | BD | AD |
| 對照組2 | BD-NGR5 | AD |
| 對照組3 | BD | AD-Xn |
| 實驗組 | BD-NGR5 | AD-Xn |
【答案】堿基序列；BD-NGR5融合蛋白；PCR擴增；變藍；確保BD與AD之間、BD-NGR5與AD之間、BD與AD-Xn之間不會相互作用
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：30引用：2難度：0.7
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