轉染是指利用一定手段使外源基因進入細胞中并穩定表達的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉染,這在基因治療、疫苗研發和動物細胞培養的可視化監控方面有著廣闊的應用前景。回答下列問題。
(1)腺病毒營寄生寄生活,用作轉染的腺病毒載體上具有RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結合的部位,是外源基因在受體細胞中啟動表達的關鍵。
(2)構建腺病毒載體時,先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進行切割,可獲得相同的黏性末端或平末端黏性末端或平末端,再用DNA連接酶恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
(3)通過腺病毒載體將藍色熒光基因轉染山羊耳緣成纖維細胞,利用藍色熒光直觀監控細胞的體外培養過程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶膠原蛋白酶處理得到單個成纖維細胞,培養至貼滿瓶壁時,細胞就會停止分裂增殖,這種現象稱為細胞的接觸抑制細胞的接觸抑制。這時,重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續進行傳代傳代培養。培養時使用的合成培養基,通常需加入血清、血漿血清、血漿等一些天然成分,以滿足細胞對營養物質的全面需求。
【考點】動物細胞培養的條件與過程.
【答案】寄生;RNA聚合酶;黏性末端或平末端;磷酸二酯鍵;膠原蛋白酶;細胞的接觸抑制;傳代;血清、血漿
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:12引用:1難度:0.7
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