CRISPR/Cas9是一種基因編輯技術，科研人員對其進行了一系列改造。
（1）Cas9蛋白能與人工設計的sgRNA形成復合體（如圖1）。復合體中的sgRNA與目的基因按照 堿基互補配對堿基互補配對原則特異性結合。復合體在sgRNA引導下結合目的基因，Cas9蛋白切割目的基因造成雙鏈斷裂，細胞在修復斷裂的DNA時會隨機插入、刪除或替換部分堿基對，從而引發 基因突變基因突變。
（2）將編碼Cas9蛋白的基因改造后形成新基因dCas9，與Cas9蛋白相比，dCas9蛋白失去剪切活性，但與sgRNA結合等功能不變。構建能夠表達dCas9的質粒A，設計一系列與紅色熒光蛋白基因（RFP基因）上游不同部位結合的sgRNA序列（如圖2），并以此為依據構建能表達sgRNA的質粒B，將質粒A、B共同導入含有 RFP基因的大腸桿菌，測定大腸桿菌紅色熒光強度，實驗結果如圖3所示。實驗結果顯示，對照組的紅色熒光強度約為sgRNA3組的 100100倍。由實驗結果可以得出：dCas9能抑制基因表達，sgRNA的結合位置距RNA聚合酶結合位點越近，對基因表達的抑制作用越強dCas9能抑制基因表達，sgRNA的結合位置距RNA聚合酶結合位點越近，對基因表達的抑制作用越強。
（3）VP64蛋白可結合RNA聚合酶，激活基因的轉錄，但VP64蛋白無法識別或結合特定的DNA片段。科研人員欲利用上述系統和VP64蛋白促進特定基因表達，請設計促進細胞中已存在的基因X表達的方案。
（4）請寫出CRISPR/Cas9及其改造產品的在科學研究中的應用。
【答案】堿基互補配對；基因突變；100；dCas9能抑制基因表達，sgRNA的結合位置距RNA聚合酶結合位點越近，對基因表達的抑制作用越強
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：40引用：1難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6