嗜熱土壤芽孢桿菌產生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業生產中更好地應用，開展了以下試驗：
Ⅰ．利用大腸桿菌表達BglB酶
（1）PCR擴增bglB基因時，選用 嗜熱土壤芽孢桿菌嗜熱土壤芽孢桿菌基因組DNA作模板．
（2）圖1為質粒限制酶酶切圖譜．bglB基因不含圖中限制酶識別序列．為使PCR擴增的bglB基因重組進該質粒，擴增的bglB基因兩端需分別引入 NdeⅠNdeⅠ和 BamHⅠBamHⅠ不同限制酶的識別序列．
（3）大腸桿菌不能降解纖維素，但轉入上述建構好的表達載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因為 轉基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶轉基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶．
Ⅱ．溫度對BglB酶活性的影響
（4）據圖2、3可知，80℃保溫30分鐘后，BglB酶會 失活失活；為高效利用BglB酶降解纖維素，反應溫度最好控制在 BB（單選）．
A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
Ⅲ．利用分子育種技術提高BglB酶的熱穩定性
在PCR擴增bglB基因的過程中，加入誘變劑可提高bglB基因的突變率．經過篩選，可獲得能表達出熱穩定性高的BglB酶的基因．
（5）與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽孢桿菌相比，上述育種技術獲得熱穩定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR過程中 A、CA、C（多選）．
A．僅針對bglB基因進行誘變 B．bglB基因產生了定向突變
C．bglB基因可快速累積突變 D．bglB基因突變不會導致酶的氨基酸數目改變．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】嗜熱土壤芽孢桿菌；NdeⅠ；BamHⅠ；轉基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶；失活；B；A、C
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：668引用：18難度：0.5
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