如圖為三種質粒和一個含目的基因的片段的示意圖．復制原點是質粒能正常復制的必需組成．圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環素抗性基因，lacZ為藍色顯色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等為限制酶及其切割的位點與復制原點的距離，1Kb=1000個堿基對長度．請據圖回答：
（1）質粒A、C不能作為目的基因運載體的理由分別是缺少標記基因、復制原點被限制酶切割缺少標記基因、復制原點被限制酶切割．
（2）將圖中的目的基因與質粒B進行重組，需要用到限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶酶．
如果是兩兩重組，可能有33種長度的重組結果．
（3）基因工程中檢測篩選含有目的基因的重組質粒是一個重要的步驟．現運用EcoRⅠ酶切質粒，完全酶切后進行電泳觀察，若出現長度為1.1kb1.1kb和5.6 kb5.6 kb，或者3.1 kb3.1 kb和3.6 kb3.6 kb的片段，則可以判斷該質粒已與目的基因重組成功．
（4）若選擇自身不含lacZ基因并對抗生素敏感的大腸桿菌作為受體細胞，則在篩選導入成功的受體細胞時應如何操作？在含有氨芐青霉素的培養基上培養經過導入處理的大腸桿菌，若能形成白色菌落的即為導入重組質粒的大腸桿菌在含有氨芐青霉素的培養基上培養經過導入處理的大腸桿菌，若能形成白色菌落的即為導入重組質粒的大腸桿菌．
（5）下列關于質粒運載體的說法正確的是ADFADF（多選）．
A．使用質粒運載體是為了避免目的基因被分解
B．質粒運載體只能在與目的基因重組后進入細胞
C．質粒運載體可能是從細菌或者病毒的DNA改造的
D．質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則
E．質粒運載體只有把目的基因整合到受體細胞的DNA中才能表達
F．沒有限制酶就無法使用質粒運載體．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】缺少標記基因、復制原點被限制酶切割；限制酶（PvuⅠ）和DNA連接酶；3；1.1kb；5.6 kb；3.1 kb；3.6 kb；在含有氨芐青霉素的培養基上培養經過導入處理的大腸桿菌，若能形成白色菌落的即為導入重組質粒的大腸桿菌；ADF
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：19引用：3難度：0.5
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6