因牛奶中的乳糖，有些人食用牛奶后會出現不適癥狀。為了解決這個問題，科學家將腸乳糖酶基因導入奶牛基因組，使該轉基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大降低，而其他營養成分不受影響。生物興趣小組想結合所學知識設計相關培育流程，請幫助他們解決下列問題。
（1）運用PCR技術擴增腸乳糖酶基因，所用的原料有 dATP、dTTP、dCTP、dGTPdATP、dTTP、dCTP、dGTP。
（2）圖a中三個DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性核酸內切酶的識別序列與切割位點，圖b為某種質粒的示意圖（質粒上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的）。
經BamHⅠ酶切得到的目的基因可以與上述質粒被 sau3AIsau3AI酶切后的產物連接，理由是 兩種限制酶切割后產生的片段具有相同的黏性末端兩種限制酶切割后產生的片段具有相同的黏性末端。腸乳糖酶基因必須插入到圖b質粒中啟動子終止子之間的目的是 使腸乳糖酶基因能夠正常轉錄使腸乳糖酶基因能夠正常轉錄。
（3）一般采用 顯微注射儀顯微注射儀（填儀器名稱）將含有腸乳糖酶基因的表達載體導入受精卵。
（4）將導入腸乳糖酶基因的受精卵移入發育培養液中進行培養，其中培養液成分除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養成分，以及 血清血清等物質。
（5）當胚胎發育到適宜階段時，進行胚胎移植。移植能否成功，主要與 受體的生理狀況受體的生理狀況有關。
（6）應用胚胎分割技術，可以提高胚胎的利用率。其中在對囊胚階段的胚胎進行分割時，要注意將內細胞團 均等均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發育。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】dATP、dTTP、dCTP、dGTP；sau3AI；兩種限制酶切割后產生的片段具有相同的黏性末端；使腸乳糖酶基因能夠正常轉錄；顯微注射儀；血清；受體的生理狀況；均等
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6