與棉花發育相關的GhMADS12基因能調節棉花根、莖、葉、花的發育和果實的成熟。科學家將克隆得到的GhMADS12基因與運載體結合構建基因表達載體的過程如圖所示。請回答下列問題:

(1)若用PCR技術擴增GhMADS12基因,需要在PCR儀中加入22種引物,引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始復制使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始復制。除了引物、DNA模板之外,PCR反應體系中還需提供Taq酶、dNTPTaq酶、dNTP。(至少答2條)
(2)GhMADS12 和pBI121質粒T-DNA經限制酶SmaⅠ和XbaⅠ切割斷開的化學鍵是磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。原核生物中的限制酶不切割自身DNA的原因是不具有切割自身DNA的限制酶或將堿基序列甲基化,使限制酶無法識別不具有切割自身DNA的限制酶或將堿基序列甲基化,使限制酶無法識別。
(3)圖中的CaMV35S為啟動子,GUS為標記基因,NOS為終止子,據圖分析,目的基因GhMADS12插入的具體位點是BB。
A.啟動子的上游
B.啟動子的下游,終止子的上游
C.終止子的下游
D.任意位點
(4)ChMADS12基因進入大腸桿菌細胞并在大腸桿菌細胞內維持穩定和表達的過程稱為轉化轉化,該過程常用Ca2+處理細胞,使細胞處于能吸收周圍DNA分子的生理狀態,這種細胞稱為感受態細胞感受態細胞。
【考點】目的基因的篩選與獲取.
【答案】2;使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始復制;Taq酶、dNTP;磷酸二酯鍵;不具有切割自身DNA的限制酶或將堿基序列甲基化,使限制酶無法識別;B;轉化;感受態細胞
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:45引用:1難度:0.6
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1.通過設計引物,運用PCR技術可以實現目的基因的定點誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程,其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對,但不影響引物與模板鏈的整體配對,反應體系中引物1和引物2的5′端分別設計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關敘述正確的是( )
A.在PCR反應體系中還需要加入4種游離核苷酸、解旋酶、TaqDNA聚合酶等 B.第2輪PCR,引物1能與圖中②結合并且形成兩條鏈等長的突變基因 C.引物中設計兩種限制酶識別位點有利于目的基因定向插入運載體 D.第3輪PCR結束后,含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占 12發布:2024/11/19 10:30:1組卷:132引用:5難度:0.7 -
2.雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結構如圖所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的DNA子鏈中后,子鏈的延伸立即終止。現通過PCR技術獲得被標記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應管中已經有單鏈模板、引物、相關的酶和相應的緩沖液等,還需加入的原料是( )
①dCTP,dGTP,dATP
②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
③α位被32P標記的ddTTP
④γ位被32P標記的ddTTPA.①③ B.①④ C.②③ D.②④ 發布:2024/10/26 17:0:2組卷:31引用:1難度:0.6 -
3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關敘述正確的是( )
A.方法①需要限制酶和DNA連接酶 B.方法②需要解旋酶和DNA聚合酶 C.方法③需要對探針進行特殊標記 D.方法①②③都遵循堿基互補配對原則 發布:2024/11/22 4:0:1組卷:25引用:2難度:0.6
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