Bar基因存在于青麻、黑麥草等生物體內，其編碼的酶可使除草劑草丁膦失去毒害作用。培育轉Bar基因大豆，對于控制豆田雜草有重要意義。為了把Bar基因導入大豆細胞，需將Bar基因插入pUc18質粒中構建中間表達載體，然后與Ti質粒重組為重組表達載體系統。如圖為pUc18質粒的結構示意圖，回答下列問題：
（1）不能利用黑麥草與大豆進行有性雜交的方法讓大豆獲得Bar基因，原因是 黑麥草與大豆之間存在生殖隔離黑麥草與大豆之間存在生殖隔離
（2）構建中間表達載體時，為了便于篩選出含有Bar基因的重組質粒，需將Br基因插入到pUc18質粒的 lacZlacZ中形成重組質粒并導入大腸桿菌，然后在添加 氨芐青霉素和Xgal氨芐青霉素和Xgal的培養基上培養大腸桿菌，菌落呈白色的即為含中間表達載體的大腸桿菌。
（3）中間表達載體需插入到Ti質粒的 T-DNAT-DNA中才能將Bar基因整合到植物細胞的染色體DNA上，原因是 T-DNA可轉移至受體細胞并整合到受體細胞的染色體DNA上T-DNA可轉移至受體細胞并整合到受體細胞的染色體DNA上。
（4）可通過 顯微注射顯微注射法直接將重組表達載體導入大豆細胞的原生質體。導入Bar基因的原生質體需 再生出細胞壁再生出細胞壁，經脫分化形成 愈傷組織愈傷組織，再進一步分化才能獲得轉Bar基因大豆植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】黑麥草與大豆之間存在生殖隔離；lacZ；氨芐青霉素和Xgal；T-DNA；T-DNA可轉移至受體細胞并整合到受體細胞的染色體DNA上；顯微注射；再生出細胞壁；愈傷組織
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：2難度：0.6
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6