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          科學家從某細菌中提取抗鹽基因,轉(zhuǎn)入煙草并培育成轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草,培育過程如圖1所示,圖2為相關限制酶識別序列及切割位點?;卮鹣铝袉栴}:


          限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ
          識別序列及切劑位點
          (1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構建重組質(zhì)粒,應選用
          Sau3AⅠ酶和BamHⅠ酶
          Sau3AⅠ酶和BamHⅠ酶
          兩種限制酶切割。若Sau3AI酶切的DNA末端與BamHI酶切的DNA末端連接,該連接序列
          不一定能
          不一定能
          (填“能”、“不能”或“不一定能”)被BamHI酶識別。
          (2)步驟①構建的表達載體,除圖1中質(zhì)粒所示結構外,還需具有
          啟動子、終止子
          啟動子、終止子
          及目的基因:步驟②中需先用
          Ca2+
          Ca2+
          處理農(nóng)桿菌以便將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌細胞;步驟③中通常需要添加酚類物質(zhì),其目的是
          吸引農(nóng)桿菌移向煙草細胞,有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化
          吸引農(nóng)桿菌移向煙草細胞,有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化
          。
          (3)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細胞在固體培養(yǎng)基上培育成完整的植株需要用
          植物組織培養(yǎng)
          植物組織培養(yǎng)
          技術,此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加
          植物激素(生長素和細胞分裂素)
          植物激素(生長素和細胞分裂素)

          (4)基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,圖2表示運用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測基因表達載體是否導入了農(nóng)桿菌。在培養(yǎng)基A篩選的基礎上,培養(yǎng)基B除了含有細菌生長繁殖必需的成分外,還應加入
          氨芐青霉素(或四環(huán)素或氨芐青霉素和四環(huán)素)
          氨芐青霉素(或四環(huán)素或氨芐青霉素和四環(huán)素)
          。從檢測篩選的結果分析,含有目的基因的是
          4和6
          4和6
          菌落中的細菌。

          【答案】Sau3AⅠ酶和BamHⅠ酶;不一定能;啟動子、終止子;Ca2+;吸引農(nóng)桿菌移向煙草細胞,有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化;植物組織培養(yǎng);植物激素(生長素和細胞分裂素);氨芐青霉素(或四環(huán)素或氨芐青霉素和四環(huán)素);4和6
          【解答】
          【點評】
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          發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:1難度:0.6
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            發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
          • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
            (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
             
             

            (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
             
            。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
             
            。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
             
            。
            (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
             
             
            ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
             
            。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
             
            。
            (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
             
            。
            (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
             
            。

            發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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            發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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