某研究小組從土壤中分離獲得能分解纖維素的細菌（A 菌），從A菌中提取一種纖維素酶基因（CBHⅡ，長度為1.4kbp）并進行PCR擴增，然后與高效表達載體pUT質粒（長度約為11.7kbp）連接構建成重組質粒并導入A菌，從而獲得分解纖維素能力更強的工程菌（B菌）。
（1）采集十樣時，可以選擇樹林中多年落葉形成的腐殖土，原因是腐殖土中富含纖維素腐殖土中富含纖維素。采集到的樣品加無菌水稀釋后不需要不需要（填“需要”或“不需要”）進行滅菌處理。
（2）CBHⅡ基因兩端需添加如表的相關酶切位點才能與圖1所示的pUT質粒連接，因此擴增CBHⅡ基因時需在兩種引物上分別添加AGATCTAGATCT序列和GGTAACCGGTAACC序列。
| 限制酶 | 識別序列及酶切位點 |
| BglⅡ | A↓GATCT |
| BstEⅡ | G↓GTAACC |
| SacⅠ | G↓AGCTC |
| MspⅠ | C↓CGG |
| BamHⅠ | G↓GATCC |
抗生素N
抗生素N
的培養基中培養，然后提取3個不同菌落的質粒分別進行雙酶切驗證，將酶切片段和CBHⅡ基因分別進行電泳，結果如圖2所示。據此分析，菌落2、3
2、3
中成功導入了重組質粒。（4）為檢測B菌的纖維素分解能力，將含有20%的纖維素的培養基分為三組，一組接種B菌，一組不做處理，一組接種
A菌
A菌
，在相同條件下培養一段時間，測培養基中纖維素含量，結果如圖3所示，說明B菌分解纖維素的能力最強
B菌分解纖維素的能力最強
。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】腐殖土中富含纖維素；不需要；AGATCT；GGTAACC；抗生素N；2、3；A菌；B菌分解纖維素的能力最強
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：28引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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