當地時間2022年1月7日，馬里蘭大學醫學院團隊表示對一名患有晚期心臟病的57歲男子實施了全球首例豬心臟移植手術。事實上，這顆豬心臟并非完全是傳統意義上的豬的心臟，而是經過了基因編輯的心臟。馬里蘭大學醫學中心表示，他們在供體豬中進行了10個獨特的基因編輯——敲掉了3個會引發免疫排斥反應的豬的基因和1個會導致心臟組織過度生長的豬的基因，并插入了6個來自人類的基因。用重組DNA技術可以賦予豬新的遺傳特性，創造出更符合人類需要的生物產品?；卮鹣铝袉栴}：
（1）在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制酶的切割位點如圖所示：
常用的DNA連接酶有E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。上圖中 EcoRI或PstⅠEcoRI或PstⅠ酶切割后的DNA片段可以用E?coliDNA連接酶連接。上圖中 EcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRVEcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRV酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。DNA連接酶催化目的基因片段與質粒載體片段之間形成的化學鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
（2）DNA重組技術中所用的質粒載體具有一些特征，如質粒DNA分子上有復制原點，可以保證質粒在受體細胞中能 自我復制自我復制；質粒DNA分子上有 限制酶切割位點限制酶切割位點，便于外源DNA插入；質粒DNA分子上有標記基因，如某種抗生素抗性基因，利用抗生素可篩選出含質粒載體的宿主細胞，方法是 將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養基中，能夠生長的是含有質粒載體的宿主細胞將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養基中，能夠生長的是含有質粒載體的宿主細胞。
（3）如果要在短時間內獲得較多的目的基因，通常采用 PCRPCR技術，該技術的原理是 DNA半保留復制DNA半保留復制。在操作步驟中需要加熱至90～95℃使 含目的基因的DNA受熱變性，從而解鏈為單鏈含目的基因的DNA受熱變性，從而解鏈為單鏈，然后降溫至55～65℃，其目的是 使引物和模板鏈結合使引物和模板鏈結合。
（4）如果檢測發現目的基因隨質粒被成功導入了受體細胞，但卻沒有檢測到目的基因相對應的蛋白質，應考慮位于目的基因首端的 啟動子啟動子和末端的 終止子終止子是否設計好，并從這方面進行改善。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】EcoRI或PstⅠ；EcoRI或SmaⅠ或PstⅠ或EcoRV；磷酸二酯鍵；自我復制；限制酶切割位點；將待篩選的宿主細胞接種到含該抗生素的培養基中，能夠生長的是含有質粒載體的宿主細胞；PCR；DNA半保留復制；含目的基因的DNA受熱變性，從而解鏈為單鏈；使引物和模板鏈結合；啟動子；終止子
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：1難度：0.5
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