魚腥草是一種需求量較大的常用中草藥，人工栽培中易感染病菌導致產量降低。科研人員利用基因工程技術將抗菌肽基因轉入魚腥草中提高其抗病性（如圖），請回答下列問題。
（1）為獲得較多的抗菌肽基因用于操作，需要用PCR技術對抗菌肽基因進行擴增，其原理是 DNA復制DNA復制。對該反應體系中的兩種引物的設計要求之一是：兩種引物之間不能發生堿基互補配對，防止 引物之間結合形成雙鏈，以免影響引物與 DNA模板鏈的結合引物之間結合形成雙鏈，以免影響引物與 DNA模板鏈的結合。
（2）圖中①過程為 構建基因表達載體構建基因表達載體，不能將抗菌肽基因直接導入受體細胞的原因是 缺少啟動子、終止子，目的基因在受體細胞中不能表達缺少啟動子、終止子，目的基因在受體細胞中不能表達。
（3）步驟②中一般情況下需要用Ca2+對農桿菌進行處理，目的是 提高農桿菌吸收重組質粒（外源DNA片段）的能力提高農桿菌吸收重組質粒（外源DNA片段）的能力。影響農桿菌轉化效率的因素有 農桿菌的濃度、農桿菌的種類、酚類物質的含量等農桿菌的濃度、農桿菌的種類、酚類物質的含量等（答2點即可）。
（4）經鑒定，轉基因成功的標志是 轉基因魚腥草產生有活性的抗菌肽 （或轉基因魚腥草的抗病菌能力得到提高）轉基因魚腥草產生有活性的抗菌肽 （或轉基因魚腥草的抗病菌能力得到提高）。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA復制；引物之間結合形成雙鏈，以免影響引物與 DNA模板鏈的結合；構建基因表達載體；缺少啟動子、終止子，目的基因在受體細胞中不能表達；提高農桿菌吸收重組質粒（外源DNA片段）的能力；農桿菌的濃度、農桿菌的種類、酚類物質的含量等；轉基因魚腥草產生有活性的抗菌肽 （或轉基因魚腥草的抗病菌能力得到提高）
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：2難度：0.7
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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