黃萎病是一種危害棉花的常見疾病，科學工作者通過轉基因技術將抗黃萎病基因——葡萄糖氧化酶基因（GO）導入棉花，獲得抗黃萎病棉花。下圖為構建的重組質粒的示意圖，已知T-DNA上的基因在農桿菌中不能表達，而在植物細胞中能表達。回答下列問題：
（1）構建基因表達載體時，利用 限制酶和DNA連接限制酶和DNA連接酶將GO定向接入Ti質粒。Ti質粒上nptII的功能是 作為標記基因，用于鑒別、篩選含有重組質粒的受體細胞作為標記基因，用于鑒別、篩選含有重組質粒的受體細胞。
（2）在如圖所示重組質粒中，目的基因的啟動子和終止子應位于 GO的兩端GO的兩端（填“Bar的兩端”或“GO的兩端”或“Bar-GO的兩端”）。啟動子具有 驅動目的基因轉錄合成mRNA驅動目的基因轉錄合成mRNA的作用。
（3）切取經無菌培養的棉花幼苗下胚軸，直接轉入含重組質粒的農桿菌培養液中侵染5～10 min后，將下胚軸放入愈傷組織誘導培養基中培養2天。成功轉化的棉花細胞能在含有 草丁膦草丁膦的培養基中生長增殖，未成功轉化的細胞不能在該培養基中生長增殖。為了檢測轉基因棉花是否含有葡萄糖氧化酶，可采用 抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交法進行檢測。
（4）若將目的基因導入動物細胞，一般采用的方法是 顯微注射法顯微注射法。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶和DNA連接；作為標記基因，用于鑒別、篩選含有重組質粒的受體細胞；GO的兩端；驅動目的基因轉錄合成mRNA；草丁膦；抗原一抗體雜交；顯微注射法
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：6引用：2難度：0.6
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