突尼斯軟籽石榴是一種熱門水果，深受大家喜愛，但其抗寒能力差，這成為限制該種石榴栽培的重要因素。科學家們利用基因工程對其進行定向改造，以得到抗寒性強的優良品種。如圖表示構建基因表達載體的方法，圖中標注的是限制酶的酶切位點，請回答下列問題：
（1）在切割目的基因時選擇的兩種限制酶最好為SmaI和PstISmaI和PstI，選擇兩種限制酶的優勢是可避免質粒自身成環和質粒與目的基因的反向連接質粒自身成環和質粒與目的基因的反向連接。
（2）可通過PCRPCR技術對獲得的抗寒基因進行體外擴增，該過程使DNA解旋的方法與細胞內復制時的差異是體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內復制目的基因使用解旋酶使DNA解旋體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內復制目的基因使用解旋酶使DNA解旋，體外擴增時使用的酶具有的顯著特點是耐高溫（或具有熱穩定性）耐高溫（或具有熱穩定性）。
（3）將重組質粒導入經脫分化脫分化（過程）培養成的軟籽石榴的愈傷組織中常用農桿菌轉化農桿菌轉化法。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】SmaI和PstI；質粒自身成環和質粒與目的基因的反向連接；PCR；體外擴增目的基因利用加熱至90～95℃的高溫使DNA解旋，細胞內復制目的基因使用解旋酶使DNA解旋；耐高溫（或具有熱穩定性）；脫分化；農桿菌轉化
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：3難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7