新冠病毒是一種帶包膜的RNA病毒，膜表面的刺突蛋白（S蛋白）與宿主細(xì)胞膜表面的受體ACE2結(jié)合，介導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，RBD是S蛋白中負(fù)責(zé)和受體ACE2結(jié)合的關(guān)鍵蛋白。基于以上研究，某科研團(tuán)隊(duì)研發(fā)了一種重組新冠病毒疫苗，制備過(guò)程如圖1所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：?
（1）為獲得更多的目的基因，可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增時(shí)應(yīng)選擇

引物Ⅱ和引物Ⅲ

引物Ⅱ和引物Ⅲ

（填圖2中的序號(hào)）作引物，引物的作用是

使DNA聚合酶能夠從3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

使DNA聚合酶能夠從3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸

，獲得的RBD蛋白基因不含有限制酶識(shí)別序列，這就需要在對(duì)目的基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，在設(shè)計(jì)的目的基因引物的

5'

5'

（填“3'”或“5'”）端加上限制酶的識(shí)別序列。
（2）構(gòu)建RBD蛋白基因表達(dá)載體是制備疫苗的核心步驟，其目的是

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，并能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，并能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

。基因表達(dá)載體含有啟動(dòng)子、終止子等成分，啟動(dòng)子的作用是

RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

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（3）體外培養(yǎng)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞時(shí)，除了需要提供無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，還要定期更換培養(yǎng)液，其目的是 

以便清除代謝產(chǎn)物，防止對(duì)細(xì)胞造成危害

以便清除代謝產(chǎn)物，防止對(duì)細(xì)胞造成危害

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（4）為進(jìn)一步檢測(cè)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞是否產(chǎn)生了RBD蛋白，需用

抗原-抗體雜交技術(shù)

抗原-抗體雜交技術(shù)

進(jìn)行檢測(cè)，該檢測(cè)方法的原理是

抗原抗體特異性結(jié)合

抗原抗體特異性結(jié)合

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