圖1為Ti質粒酶切圖譜。圖2為含Bt基因（殺蟲毒蛋白基因）的外源DNA片段的限制酶酶切圖譜。圖3表示相關限制酶的識別序列及切割位點。現欲通過農桿菌轉化法培育轉Bt基因抗蟲棉。回答下列問題：

（1）除四環素抗性基因和Bt基因外，作為表達載體，該質粒至少還應該具有

啟動子、終止子（或復制原點）

啟動子、終止子（或復制原點）

等調控元件；PstⅠ等的識別序列及切割位點應位于

T-DNA

T-DNA

片段內，以確保Bt基因隨Ti質粒進入棉花細胞后能插入到棉花細胞中的染色體DNA上。
（2）為保證Bt基因與Ti質粒的正常連接，應選用

PstⅠ

PstⅠ

酶和MseⅠ酶切割外源DNA，并將Ti質粒上的序列“GAATTC”改造為

GAATTAATTC

GAATTAATTC

。
（3）轉Bt基因的棉花細胞經過

脫分化、再分化

脫分化、再分化

過程可以培育成轉基因棉花幼苗；利用抗原—抗體反應等原理，可以檢測轉基因抗蟲棉幼葉中的Bt毒蛋白及其含量，以此來檢測

Bt基因是否表達及表達程度

Bt基因是否表達及表達程度

。
（4）我國發放了6種轉基因植物進口安全證書，但進口的基本上是轉基因棉花的纖維而不是轉基因玉米等糧食產品，從轉基因技術安全性的角度分析，原因是

轉基因糧食產品用于加工成食品，可能影響人體健康，而轉基因棉花的纖維不是用于加工成食品

轉基因糧食產品用于加工成食品，可能影響人體健康，而轉基因棉花的纖維不是用于加工成食品

。